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一種人糞便樣本中脫落細(xì)胞DNA的提取試劑盒及提取方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-31
  • 技術(shù)成熟度:已有樣品
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過(guò)戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào) CN201711086407.0 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種人糞便樣本中脫落細(xì)胞DNA的提取試劑盒及提取方法 
  • 項(xiàng)目單位 泰州達(dá)安達(dá)瑞醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
  • 發(fā)明人 李明,楊俊,陸穎鍶,韓麗娜,黃曦,何金津,周進(jìn)生,丘遠(yuǎn)輝 
  • 行業(yè)類別 中藥材獲取-動(dòng)物藥材養(yǎng)殖
  • 技術(shù)成熟度 已有樣品
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 褚俞夏
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-12-31  
  • 01

    項(xiàng)目簡(jiǎn)介

    本發(fā)明提供了一種人糞便樣本中脫落細(xì)胞DNA的提取試劑盒,其特征在于,包括如下試劑:1)樣本保存液SPB;2)細(xì)胞捕獲劑CCB;3)細(xì)胞裂解液I;4)DNA提取液I;5)DNA溶解液EB;6)無(wú)水乙醇和75%乙醇。本發(fā)明還提供了使用試劑盒用于人糞便樣本中脫落細(xì)胞DNA的提取方法。本發(fā)明有以下優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用價(jià)值:1.樣本采樣簡(jiǎn)便、無(wú)創(chuàng)、個(gè)性便捷,無(wú)需專人協(xié)助取樣,可自行取樣;糞便樣本取樣簡(jiǎn)單(無(wú)需取糞便樣本硬性要求的特定位置,隨機(jī)取成型的糞便樣本即可),取人者可自行取樣,無(wú)需到醫(yī)院由專業(yè)人士協(xié)助取樣,便捷、非侵入、取樣者體驗(yàn)友好。2.樣本保存方便:常溫放置即可;3.樣本預(yù)處理簡(jiǎn)單:無(wú)需做離心淘洗法、密度梯度離心法、及免疫磁珠法等處理。
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  • 02

    說(shuō)明書

    1.一種人糞便樣本中脫落細(xì)胞DNA的提取試劑盒,其特征在于,包括如下試劑:1)樣本保存液SPB;2)細(xì)胞捕獲劑CCB;3)細(xì)胞裂解液I;4)DNA提取液I;5)DNA溶解液EB;6)無(wú)水乙醇和75%乙醇;其中,所述的樣本保存液SPB 的組分及各組分在樣本保存液SPB中的含量如下:EDTA100mMol/L;Tris 0.5mol/L;NaCl 10mMol/L;所述的樣本保存液SPB的pH值為7;所述的細(xì)胞捕獲劑CCB的組分及各組分在細(xì)胞捕獲劑CCB中的含量如下:PEG6000 150-250g/L;NaCl 2-5mol/L;所述的細(xì)胞裂解液I的組分及各組分在細(xì)胞裂解液I中的含量如下:異硫氰酸胍472.5mg/ml;EDTA 20mmol/L;二硫蘇糖醇 32.5mmol/l;TritonX-100 4%v/v;Tris-HCl10mmol/L;細(xì)胞裂解液I的pH值為6.5;所述的DNA提取液I的組分及濃度如下:鹽酸胍 573g/L;所述的DNA溶解液EB的組分及濃度如下:Tris-HCL 10mM。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人糞便樣本中脫落細(xì)胞DNA的提取試劑盒,其特征在于,所述的細(xì)胞捕獲劑CCB的組分及各組分在細(xì)胞捕獲劑CCB中的含量如下:PEG6000 200g/L;NaCl3.5mol/L。3.使用如權(quán)利要求1所述的試劑盒提取人糞便樣本中脫落細(xì)胞DNA的方法,其特征在于,包括如下步驟:在預(yù)先加入固定體積的樣本保存液SPB中加入糞便樣本使其液位上升到取樣管的指定刻度,即可滿足最低取樣需求,將取好的糞便樣本高速漩渦混合均勻,離心棄沉淀,取糞便樣本上清液即富含脫落細(xì)胞的懸浮液,然后加入等體積的細(xì)胞捕獲劑CCB,混合均勻后,離心棄上清,取沉淀,即脫落細(xì)胞沉淀物,往沉淀中加入細(xì)胞裂解液I,混合均勻使沉淀完全溶解后,孵育10-15min后,加入等體積DNA提取液I混合均勻后,加入2倍體積的無(wú)水乙醇沉淀核酸,獲得富含核酸的母液,將此時(shí)的母液全部通過(guò)核酸吸附柱,母液中的核酸將結(jié)合到吸附柱的硅膠膜上,用75%的乙醇洗脫三次后,待殘留乙醇揮發(fā)干凈后,最后用DNA溶解液EB將核酸從吸附柱上洗脫下來(lái)。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述的樣本保存液SPB與樣本的體積重量比為3ml:1g。
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專利技術(shù)附圖

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