本發明公開了一種與肝癌預后相關的血清miRNA標志物及其檢測試劑盒的應用。該腫瘤標志物為人類肝癌患者相關的血清miR?29a?3p和miR?192?5p。本發明前期工作經過高通量深度測序，篩選出了包含miR?29a?3p和miR?192?5p在內的表達差異明顯的肝癌相關血清miRNA表達譜，并且經定量PCR(qPCR)驗證，最終確認血清miR?29a?3p和miR?192?5p是肝癌危險度(預后)相關的腫瘤標志物。本發明的標志物和檢測試劑可用于制備快速檢測定量PCR試劑盒，具有檢測快速方便，準確率高、無創傷等特點；并且miR?29a?3p、miR?192?5p及肝癌巴塞羅那分期(BCLC stage)三者聯合構建的預后模型，可用于肝癌患者危險度高低的分級分層，從而指導肝癌病人個體化治療。

1.一種肝癌預后標記物在制備用于評估肝癌預后危險度的肝癌血清miRNA檢測試劑盒的應用，其特征在于，所述標記物為miR-29a-3p和miR-192-5p的組合，所述miR-29a-3p序列信息如SEQ ID NO.1所示；miR-192-5p序列信息如SEQ ID NO.2所示。2.如權利要求1所述的一種肝癌預后標記物在制備用于評估肝癌預后危險度的肝癌血清miRNA檢測試劑盒的應用，其特征是，基于所述標記物的預后風險模型公式為：Y＝2.19*A_{BCLC stage}+1.45*B_miR-192-5p+1.81*C_miR-29a-3p；A_{BCLC stage}取值0或1，0代表為早期，1代表為晚期；B_miR-192-5p取值0或1，0代表miR-192-5p為低表達，表達量2^-△△CT<2.24；1代表其為高表達，表達量2^-△△CT≥2.24；C_miR-29a-3p取值0或1，0代表miR-29a-3p為低表達，表達量2^-△△CT<1.37；1代表其為高表達，表達量2^-△△CT≥1.37；當Y值<1.81時為患者生存風險低危，Y值>1.81時，患者為生存風險中高危。3.如權利要求1所述的一種肝癌預后標記物在制備用于評估肝癌預后危險度的肝癌血清miRNA檢測試劑盒的應用，其特征是：試劑盒包括用于配制反轉錄反應體系的試劑、用于配制qPCR反應體系的試劑和用于配制內參體系的試劑；其中，用于配制反轉錄反應體系的試劑至少包括分別針對miR-29a-3p、miR-192-5p和線蟲cel-miR-39的特異性莖環法反轉錄引物液；用于配制qPCR反應體系的試劑至少包括分別針對miR-29a-3p、miR-192-5p和線蟲cel-miR-39的正向引物液和反向通用引物液；用于配制內參體系的試劑包括內參cel-miR-39液，cel-miR-39的序列信息如SEQ ID NO.3所示。4.如權利要求3所述的一種肝癌預后標記物在制備用于評估肝癌預后危險度的肝癌血清miRNA檢測試劑盒的應用，其特征是：所述用于配制反轉錄反應體系的試劑還包括反轉錄酶液、dNTP混合液、核糖核酸酶抑制劑液、反轉錄緩沖液和無核酸酶純水。5.如權利要求3所述的一種肝癌預后標記物在制備用于評估肝癌預后危險度的肝癌血清miRNA檢測試劑盒的應用，其特征是：所述反轉錄反應體系的總體積為25μl；其中，總RNA樣品2μl、特異性莖環法反轉錄引物液2μl、反轉錄酶液0.5μl、dNTP混合液2μl、核糖核酸酶抑制劑液0.5μl、反轉錄緩沖液5μl和無核酸酶純水13μl；所述總RNA樣品中含有內參cel-miR-39液。6.如權利要求5所述的一種肝癌預后標記物在制備用于評估肝癌預后危險度的肝癌血清miRNA檢測試劑盒的應用，其特征是：所述總RNA樣品的制備，是在抽提250μl血清總RNA過程中加入的體積為2μl的內參cel-miR-39液，所述內參cel-miR-39液使用濃度為0.05pmol/μl。7.如權利要求3所述的一種肝癌預后標記物在制備用于評估肝癌預后危險度的肝癌血清miRNA檢測試劑盒的應用，其特征是：用于配制qPCR反應體系的試劑還包括SYBR Green混合液、ROX Reference Dye II液和純水。8.如權利要求7所述的一種肝癌預后標記物在制備用于評估肝癌預后危險度的肝癌血清miRNA檢測試劑盒的應用，其特征是：所述qPCR反應體系的總體積為20μl；其中，所述SYBRGreen混合液的體積是9μl，所述正向引物液的體積是0.8μl，所述反向通用引物液的體積是0.8μl，所述ROX Reference Dye II液0.4μl，cDNA模板是4μl，其余是純水；所述正向引物液的使用濃度為5μM，所述反向通用引物液的使用濃度為5μM；所述cDNA模板是所述反轉錄反應體系反應后的產物。