1.用于檢測VanB基因的LAMP引物,是根據GenBank號為CP002077.1的VanB基因P1的特
異性保守靶序列設計的,用以定性檢測純菌、患者糞便或血液樣品中的VanB基因,所述VanB
基因的特異性保守靶序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,所述LAMP引物由四條引物組成,包
括核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的外引物VanB12-F3和VanB12-
B3、以及核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的內引物VanB12-FIP和
VanB12-BIP的組合。
2.根據權利要求1所述的用于檢測VanB基因的LAMP引物,其特征在于:所述的LAMP引
物,為外引物VanB12-F3和VanB12-B3、內引物VanB12-FIP和VanB12-BIP按摩爾比5:40的組
合物。
3.一種用于對VanB基因進行LAMP檢測的試劑盒,包括權利要求1或2所述用于對VanB基
因進行LAMP檢測的引物。
4.根據權利要求3所述的用于對VanB基因進行LAMP檢測的試劑盒,其特征在于:所述試
劑盒包括以下用于25μL反應體系的試劑,反應體系不含模板:主要成分包括pH 8.8的2mM
Tris·HCl 0.7μL,10mM KCl 3.8μL,10mM(NH4)2SO4 3.8μL,0.1%Tween20 0.4μL,0.8M甜菜
堿0.3μL,8mM MgSO4 3μL,1.4mM dNTP 0.5μL,8U Bst DNA聚合酶1μL,ddH2O 7.7μL的
Mixture 21.2μL,引物加入量分別為:①50mM引物VanB12-F3 0.1μL,使終濃度為5pmol;②
50mM引物VanB12-B3 0.1μL,使終濃度為5pmol;③50mM引物VanB12-FIP 0.8μL,使終濃度為
40pmol;④50mM引物VanB12-BIP 0.8μL,使終濃度為40pmol。
5.根據權利要求3或4所述的用于對VanB基因進行LAMP檢測的試劑盒,其特征在于:所
述試劑盒中還包括陽性對照和陰性對照,所述陽性對照為攜帶VanB基因糞腸球菌V583,所
述陰性對照為不含DNA的雙蒸水。
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