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一種檢測柯薩奇病毒A2、A5型的熒光定量試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-17
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201410012003.7 
  • 技術(專利)名稱 一種檢測柯薩奇病毒A2、A5型的熒光定量試劑盒 
  • 項目單位 浙江大學
  • 發明人 陳瑜,李蘭娟,謝國良,崔大偉 
  • 行業類別 智慧健康-健康大數據
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 衛德熙
  • 發布時間 2021-12-17  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供一種檢測柯薩奇病毒A2、A5型的熒光定量試劑盒,由定量RT-PCR反應液、酶混合液、引物探針混合液、CVA2和CVA5標準品、CVA2和CVA5強陽性對照品、CVA2和CVA5弱陽性對照品、陰性對照品組成。本發明運用一步法實時熒光定量RT-PCR技術,采用CVA2、CVA5高度特異的引物和熒光標記探針,從糞便標本中同時檢測出是否有CVA2、CVA5的存在,比單重熒光定量PCR方法更便捷迅速、節約成本。檢測實時、準確定量,為臨床提供早期診斷,為臨床治療方案的制定提供參考依據;可應用于柯薩奇病毒A2、A5型引起暴發疫情的實驗室應急診斷、快速篩查、臨床診斷及手足口病的流行病學的研究。
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  • 02

    說明書

    1.一種檢測柯薩奇病毒A2、A5型的熒光定量試劑盒,其特征在于,本試劑盒由定量RT-PCR反應液、酶混合液、引物探針混合液、CVA2標準品、CVA5標準品、CVA2強陽性對照品、CVA5強陽性對照品、CVA2弱陽性對照品、CVA5弱陽性對照品、陰性對照品組成,其中定量RT-PCR反應液包含PCR反應緩沖液、氯化鎂和三磷酸脫氧核糖核苷酸混合物,酶混合液含耐熱Taq?DNA聚合酶、RNA酶抑制劑和MMLV逆轉錄酶,引物探針混合液包含CVA2、CVA5兩組特異性引物和相應的CVA2、CVA5兩種熒光標記的特異性探針,陰性對照為高溫高壓滅菌的焦碳酸二乙酯處理水,CVA2、CVA5強陽性對照品和CVA2、CVA5弱陽性對照品為包含CVA2、CVA5的基因序列的陽性質粒樣品;強陽性對照品質粒濃度為106copies/ml,弱陽性對照品質粒濃度為103copies/ml;????CVA2、CVA5兩組特異性引物和CVA2、CVA5兩種熒光標記的特異性探針序列如下:上游引物CVA2-F:?5’-?AGTCGRCCAGTGTCTCAYTCA-3’,下游引物CVA2-R:5’-TACACGCCCRGTCTCAATGG-3’,特異性探針CVA2-P:?5’-FAM-?AACAGCTGCWAACACCCAGGTRAGCC-BHQ1-3’,上游引物CVA5-F:?5’-?AAGCGGCGGAGACAGGAG-3’,下游引物CVA5-R:?5’-?CCATGCCTGTTGACCACACA-3’,特異性探針CVA5-P:?5’-HEX-?CAAAYGCCACCGAYGARAGCATGA-BHQ1-3’。2.根據權利要求1所述的一種檢測柯薩奇病毒A2、A5型的熒光定量試劑盒,其特征在于,CVA2、CVA5的特異性探針分別采用FAM、HEX兩種熒光標記。3.根據權利要求1所述的一種檢測柯薩奇病毒A2、A5型的熒光定量試劑盒,其特征在于,所述CVA2、CVA5標準品的基因序列如下:CVA2標準品序列為:AATGCTACGATAGACAGGGTGTTGAGTCGGCCAGTGTCTCATTCACCAACAGCTGCTAACACCCAGGTGAGCCAGCACTCCATTGAGACTGGGCGTGTACCTGCACTACAAGCTGCTGAAACG;CVA5標準品序列為:ACAGGGCAGGTACCAGCTCTGCAAGCGGCGGAGACAGGAGCGACCTCAAACGCCACCGATGAAAGCATGATTGAAACCAGGTGTGTGGTCAACAGGCATGGGGTTATGGAAACAAGTGTTGAG。4.根據權利要求1所述的一種檢測柯薩奇病毒A2、A5型的熒光定量試劑盒,其特征在于,引物探針混合液保存于棕色管。5.根據權利要求1所述的一種檢測柯薩奇病毒A2、A5型的熒光定量試劑盒,其特征在于,所述試劑盒于-20℃儲存,減少反復凍融。
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