本發明公開了一種鴨I型肝炎病毒和番鴨細小病毒的二重熒光定量RT-PCR檢測試劑盒。本發明提供了檢測鴨I型肝炎病毒和番鴨細小病毒的二重熒光PCR的引物組，由引物1、引物2、引物3和引物4組成；所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的核苷酸序列分別依次為序列表中的序列1、序列2、序列4和序列5。本發明的實驗證明，本發明的引物和方法具有檢測時間短、靈敏度高和特異性強的特點。

1.檢測鴨I型肝炎病毒和番鴨細小病毒的二重熒光PCR的試劑A，由引物組、探
針A和探針B組成；
所述引物組由引物1、引物2、引物3和引物4組成；
所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的核苷酸序列分別依次為序
列表中的序列1、序列2、序列4和序列5；
所述探針A的核苷酸序列為序列表中的序列3，且所述探針A的5’端標記有報
告熒光染料A，3’端標記有淬滅熒光染料C；
所述探針B的核苷酸序列為序列表中的序列6，且所述探針B的5’端標記有報
告熒光染料B，3’端標記有淬滅熒光染料D。
2.根據權利要求1所述的試劑A，其特征在于：
所述報告熒光染料A為FAM，
所述報告熒光染料B為ROX；
所述淬滅熒光染料C為BHQ1；
所述淬滅熒光染料D為BHQ2；
所述試劑中所述引物1、所述引物2、所述探針A、所述引物3、所述引物4和所
述探針B的摩爾比為3:3:3:1:1:1。
3.檢測鴨I型肝炎病毒和番鴨細小病毒的二重熒光PCR試劑B，由權利要1或2
所示的試劑A、PCR擴增緩沖液和水組成。
4.根據權利要求3所示的試劑B，其特征在于：
所述引物1、所述引物2和所述探針A在所述試劑B中的濃度均為0.6μM；
所述引物3、所述引物4和所述探針B在所述試劑B中的濃度均為0.2μM。
5.檢測鴨I型肝炎病毒和番鴨細小病毒的二重熒光PCR的試劑盒，包括權利要求
1或2所述的試劑A或權利要求3或4所述的試劑B。
6.權利要求1或2所述的試劑A或權利要求3或4所述的試劑B或權利要求5
所述試劑盒在制備檢測和/或輔助檢測待測樣品中是否含有鴨I型肝炎病毒和/或番鴨
細小病毒產品中的應用。
7.根據權利要求6所述應用，其特征在于：所述檢測和/或輔助檢測待測樣品中
是否含有鴨I型肝炎病毒和/或番鴨細小病毒為用權利要求1或2所述的試劑A或權利
要求3或4所述的試劑B或權利要求5所述試劑盒對所述待測樣品進行二重熒光PCR
反應。