本發(fā)明部分涉及編碼蛋白質(zhì)的核酸；含有非規(guī)范核苷酸的核酸；包含核酸的治療劑；用于誘導(dǎo)細胞表達蛋白質(zhì)的方法、試劑盒和裝置；用于轉(zhuǎn)染、基因編輯和重新編程細胞的方法、試劑盒和裝置；以及使用這些方法、試劑盒和裝置產(chǎn)生的細胞、生物體和治療劑。本文公開了使用RNA用于誘導(dǎo)細胞表達蛋白質(zhì)和用于重新編程和基因編輯細胞的方法。還公開了用于從患者樣品中產(chǎn)生細胞的方法、使用這些方法產(chǎn)生的細胞以及包含使用這些方法產(chǎn)生的細胞的治療劑。

1.重編程細胞至較低分化狀態(tài)的方法，包括：
a.使用包含白蛋白的重編程培養(yǎng)基培養(yǎng)分化的細胞，其中所述白
蛋白用離子交換樹脂或木炭處理；
b.使用一種或多種合成的RNA分子轉(zhuǎn)染所述細胞，其中所述一
種或多種合成的RNA分子包括至少一種編碼一種或多種重編程因子
的RNA分子，并且其中所述轉(zhuǎn)染導(dǎo)致所述細胞表達所述一種或多種
重編程因子；和
c.在連續(xù)5天期間重復(fù)步驟(b)至少2次，以使所述細胞被重編程
至較低分化狀態(tài)。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述白蛋白用辛酸鈉處理。
3.權(quán)利要求2的方法，其中使所述白蛋白達到至少40℃的溫度。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述一種或多種合成的RNA分子包
括至少一種編碼下組中的至少一個成員的RNA分子：Oct4蛋白、Sox2
蛋白、Klf4蛋白和c-Myc蛋白。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述一種或多種合成的RNA分子包
括至少一種編碼Oct4蛋白的RNA分子、至少一種編碼Sox2蛋白的
RNA分子、至少一種編碼Klf4蛋白的RNA分子和至少一種編碼c-Myc
蛋白的RNA分子。
6.權(quán)利要求1的方法，還包括將所述細胞與下組中的至少一個成
員接觸：聚-L-賴氨酸、聚-L-鳥氨酸、RGD肽、纖連蛋白、玻連蛋白、
膠原以及層粘連蛋白。
7.權(quán)利要求1的方法，其中所述一種或多種合成的RNA分子包
括下組中的至少一個成員：假尿苷殘基和5-甲基胞苷殘基。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述細胞是皮膚細胞。
9.重編程細胞至較低分化狀態(tài)的方法，包括：
a.使用包含白蛋白的重編程培養(yǎng)基培養(yǎng)分化的細胞，其中所述白
蛋白用辛酸鈉處理、達到至少40℃的溫度并用離子交換樹脂或木炭處
理；
b.使用一種或多種合成的RNA分子轉(zhuǎn)染所述細胞，其中所述一
種或多種合成的RNA分子包括至少一種編碼一種或多種重編程轉(zhuǎn)錄
因子的RNA分子，并且其中所述轉(zhuǎn)染導(dǎo)致所述細胞表達所述一種或
多種合成的RNA分子；和
c.在連續(xù)5天期間重復(fù)步驟(b)至少2次，以使所述細胞被重編程
至較低分化狀態(tài)。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述一種或多種合成的RNA分子包
括至少一種編碼下組中的至少一個成員的RNA分子：Oct4蛋白、Sox2
蛋白、Klf4蛋白和c-Myc蛋白。
11.權(quán)利要求9的方法，其中所述一種或多種合成的RNA分子包
括至少一種編碼Oct4蛋白的RNA分子、至少一種編碼Sox2蛋白的
RNA分子、至少一種編碼Klf4蛋白的RNA分子和至少一種編碼c-Myc
蛋白的RNA分子。
12.權(quán)利要求9的方法，還包括將所述細胞與下組中的至少一個
成員接觸：聚-L-賴氨酸、聚-L-鳥氨酸、RGD肽、纖連蛋白、玻連蛋
白、膠原以及層粘連蛋白。
13.權(quán)利要求9的方法，其中所述一種或多種合成的RNA分子包
括下組中的至少一個成員：假尿苷殘基和5-甲基胞苷殘基。
14.權(quán)利要求9的方法，其中所述細胞是皮膚細胞。