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改進的從磁性玻璃顆粒中的核酸回收

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-24
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201180005525.9 
  • 技術(專利)名稱 改進的從磁性玻璃顆粒中的核酸回收 
  • 項目單位 霍夫曼-拉羅奇有限公司
  • 發明人 J.A.約翰遜,E.凱格 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 吳懿
  • 發布時間 2022-01-24  
  • 01

    項目簡介

    本發明是一種使用能夠結合核酸的固相,例如磁性玻璃顆粒分離核酸的方法,其中通過乙烯胺化合物的存在增強核酸與固相的結合。本發明還包括用于分離核酸的包含乙烯胺化合物的反應混合物和用于實施所述方法的試劑盒。
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  • 02

    說明書

    1.一種從包含核酸的樣品溶液中分離核酸的方法,其包括a.?使樣品溶液與能夠結合核酸的固相和包含亞乙基胺化合物的結合混合物接觸;b.?在核酸可結合固相的條件下孵育包含固相的樣品溶液;和c.?從溶液中分離固相,其中所述能夠結合核酸的固相包含具有磁性核心和含二氧化硅的外層的顆粒,和其中所述亞乙基胺化合物具有通式NH2-CH2-CH2-(NH-CH2?-CH2)n–NH2,其中n是0?–?9或更大;其中所述方法不包括用酰化劑處理的步驟。2.權利要求1的方法,其還包括洗滌結合固相的核酸。3.權利要求1的方法,其還包括從固相洗脫核酸。4.權利要求1的方法,其中所述樣品溶液通過裂解細胞得到。5.權利要求4的方法,其中所述樣品溶液通過裂解選自芽孢桿菌(Bacillus梭菌(Clostridium),葡萄球菌(Staphylococcus),鏈球菌(Streptococcus),腸球菌(Enterococcus),分支桿菌(Mycobacterium)及其組合的革蘭氏陽性菌得到。6.權利要求1的方法,其中在步驟(a)中的所述結合混合物還包含鎂或錳離子。7.權利要求1的方法,?其中在步驟(a)中的所述結合混合物還包含堿金屬氫氧化物和去垢劑。8.權利要求7的方法,其中在步驟(a)中的所述結合混合物包含等體積的溶液?1和溶液2的混合物,所述溶液1為50mM?NaOH,1%?Triton?X-100,1mM?EDTA,0.05%?NaN3,pH?12+;所述溶液2為10-65mM?亞乙基胺,200mM?Tris,5-25mM?MgCl2,0.05%?NaN3,pH?7.5。9.一種用于使用固相從樣品中分離核酸的反應混合物,所述混合物包含:包含具有磁性核心和含二氧化硅的外層的顆粒的能夠結合核酸的固相,具有通式NH2-CH2-CH2-(NH-CH2?-CH2)n–NH2的亞乙基胺化合物,其中n是0?–?9或更大,和鎂或錳離子;其中所述混合物不包含酰化劑。10.權利要求9的反應混合物,其還包含堿金屬氫氧化物和去垢劑。11.一種用于使用固相從樣品中分離核酸的試劑盒,所述試劑盒包含:包含具有磁性核心和含二氧化硅的外層的顆粒的能夠結合核酸的固相,具有通式NH2-CH2-CH2-(NH-CH2?-CH2)n–NH2的亞乙基胺化合物,其中n是0?–?9或更大,和一種或多種裂解試劑、中和試劑、洗滌試劑和洗脫試劑,其中所述裂解試劑包含堿金屬氫氧化物和去垢劑,中和試劑包含一種所述亞乙基胺化合物,鎂或錳離子和緩沖液;其中所述試劑盒不包含?;瘎?。
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專利技術附圖

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