1.一種正向PCR引物和反向PCR引物,其中:
a)所述正向PCR引物的核酸序列為SEQ?ID?NO:17、SEQ?ID?NO:
18或SEQ?ID?NO:6中所提供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:6:cactagtcag?catcaagcta?gg;
SEQ?ID?NO:17:caaacctcac?tagtcagcat?caagctagg;
SEQ?ID?NO:18:gtttggacac?tagtcagcat?caagctagg;
并且/或者,
b)所述反向PCR引物的核酸序列為SEQ?ID?NO:19或SEQ?ID?
NO:7中所提供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:7:ttccagaggc?aatgccaaag;
SEQ?ID?NO:19:agattccaga?ggcaatgcca?aagaaa。
2.一種核酸探針,該核酸探針的核酸序列為SEQ?ID?NO:5中所
提供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:5:ctgtccgctg?gttcttcctt?act。
3.一種正向PCR引物、反向PCR引物和核酸探針,其中,
所述正向PCR引物的核酸序列為SEQ?ID?NO:17、SEQ?ID?NO:
18或SEQ?ID?NO:6中所提供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:6:cactagtcag?catcaagcta?gg;
SEQ?ID?NO:17:caaacctcac?tagtcagcat?caagctagg;
SEQ?ID?NO:18:gtttggacac?tagtcagcat?caagctagg;
并且/或者
所述反向PCR引物的核酸序列為SEQ?ID?NO:19或SEQ?ID?NO:
7中所提供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:7:ttccagaggc?aatgccaaag;
SEQ?ID?NO:19:agattccaga?ggcaatgcca?aagaaa;
并且/或者
所述核酸探針的核酸序列為SEQ?ID?NO:5或其互補序列中所提
供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:5:ctgtccgctg?gttcttcctt?act;
其中所述正向PCR引物、所述反向PCR引物和/或所述核酸探
針包含小溝結合部分,或者其中所述正向PCR引物、所述反向PCR
引物和所述核酸探針為鎖核酸(LNA)。
4.根據權利要求1所述的正向PCR引物和反向PCR引物,根
據權利要求2所述的核酸探針,或者根據權利要求3所述的正向PCR
引物、反向PCR引物和核酸探針,其中所述正向PCR引物、所述反
向PCR引物或所述核酸探針與電化學活性標記物結合。
5.一種PCR組分,其包含權利要求1或3中所限定的正向PCR
引物,以及權利要求1或3中所限定的反向PCR引物。
6.根據權利要求5所述的PCR組分,其還包含權利要求2或3
中所限定的核酸探針。
7.根據權利要求5或6所述的PCR組分,其還包含用作陽性內
對照的來源于黑腐堅固桿菌(Pectobacterium?atrosepticum)的基因組
DNA。
8.根據權利要求7所述的PCR組分,其中所述黑腐堅固桿菌為
ATCC?BAA-672菌株。
9.根據權利要求7或8所述的PCR組分,其包含第二正向PCR
引物和第二反向PCR引物,其中所述引物被設計為與包含于SEQ?ID?
NO:8或其互補的核酸序列中的靶核酸序列雜交;
SEQ?ID?NO:8:ctaccgtgta?gggtcatagg?cattgacctc?atggctccac
ggaatcgtgc?gatcgtcaac?tgcgacgtgc?cattcacagt?gcgtaagagc
accgcgaatc?tcggataaac?actggcacca?gtgctgtacg?ccaatccaga
ttgcttcttc?ctcgctgtcg?ggaagtttgg?ttgaaccgga?gagcacgatc
cctttcctaa?agacgttacc?gattttcaca?ttgagggcga?aatcaaagga
ttcccagttc?aggcctgtac?ccgtcgtcag?atatttctca?atttggtcat
taacagaatg?gcgttggacg?atctccttca?cggcagatat?ctctttctgg
ctcagggatt?ttttacgtcg?agcggtgtaa?tagagcgaaa?ttgccac。
10.根據權利要求9所述的PCR組分,其中:
a.所述第二正向PCR引物的核酸序列為SEQ?ID?NO:9中所提
供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:9:ctcgctgtcg?ggaagtttgg?ttgaaccg;
并且
b.所述第二反向PCR引物的核酸序列為SEQ?ID?NO:10中所提
供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:10:acaggcctga?actgggaatc?ctttgatttc;
或者其中所述第二正向PCR引物的核酸序列為上述部分b)中
所限定的反向引物的互補序列,并且所述第二反向PCR引物的核酸
序列為上述部分a)中所限定的正向引物的互補序列。
11.根據權利要求10所述的PCR組分,其中所述第二正向PCR
引物的核酸序列為SEQ?ID?NO:11中所提供的序列的核酸;
SEQ?ID?NO:11:tgtcgggaag?tttggttg;
并且其中所述第二反向PCR引物的核酸序列為SEQ?ID?NO:12
中所提供的序列的核酸;
SEQ?ID?NO:12:cctgaactgg?gaatcctttg。
12.根據權利要求9所述的PCR組分,其中下述未限定的所述
第二正向PCR引物或所述反向PCR引物如權利要求11所限定的那
樣,但其中所述引物中的至少一種為:
a)核酸序列為SEQ?ID?NO:9中所提供的核酸序列的第二正向
PCR引物;
SEQ?ID?NO:9:ctcgctgtcg?ggaagtttgg?ttgaaccg;
并且
b)核酸序列為SEQ?ID?NO:10中所提供的核酸序列的第二反向
PCR引物;
SEQ?ID?NO:10:acaggcctga?actgggaatc?ctttgatttc;
其中所述引物包含小溝結合部分,或者其中所述引物為鎖核酸
(LNA)。
13.根據權利要求9至12中任意一項所述的PCR組分,其中所
述聚合酶鏈式反應涉及使用這樣的第二核酸探針,該第二核酸探針的
核酸序列為SEQ?ID?NO:13或其互補序列中所提供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:13:ggagagcacg?atccctttcc?taaagacgtt?acc。
14.根據權利要求13所述的PCR組分,其中所述第二核酸探針
包含SEQ?ID?NO:14中所提供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:14:gcacgatccc?tttcctaaag?acg。
15.根據權利要求9至12中任意一項所述的PCR組分,其中所
述聚合酶鏈式反應涉及使用這樣的第二核酸探針,該第二核酸探針的
核酸序列為SEQ?ID?NO:13或其互補序列中所提供的核酸序列;
SEQ?ID?NO:13:ggagagcacg?atccctttcc?taaagacgtt?acc;
其中所述第二核酸探針包含小溝結合部分,或者其中所述核酸
探針為鎖核酸。
16.一種試劑盒,其包含權利要求5至15中任意一項所述的PCR
組分以及用途說明書。
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