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用于改進的核酸擴增反應的嵌合引物

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-09-15
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200880105297.0 
  • 技術(專利)名稱 用于改進的核酸擴增反應的嵌合引物 
  • 項目單位 吉納珀萊有限公司
  • 發明人 奧菲爾·皮萊格 
  • 行業類別 藥品-中藥
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 王藝晶
  • 發布時間 2021-09-15  
  • 01

    項目簡介

    提供了用于核酸序列擴增的方法。本方法使用RNA/DNA嵌合寡核苷酸作為引物。所述引物具有沿其長度散在分布的RNA殘基,且引物中沒有兩個核糖核苷酸是彼此相鄰的。本方法可用于減少如引物二聚體等非特異性擴增產物。本發明還提供了包含用于實踐本擴增方法的RNA/DNA嵌合寡核苷酸引物的試劑盒。
    展開
  • 02

    說明書

    1.至少一個RNA/DNA嵌合寡核苷酸作為正向引物或者作為反向引
    物或者作為探針和DNA依賴性DNA聚合酶在制備用于在DNA依賴性
    DNA聚合酶擴增反應中減少或消除人工產物和非特異性擴增產物形成的
    試劑盒中的用途,
    其中所述嵌合寡核苷酸包含至少一個核糖核苷酸;
    其中位于所述嵌合寡核苷酸的3’末端或位于所述嵌合寡核苷酸的3’
    末端的10個核苷酸以內的核糖核苷酸的數目將允許當所述引物和預期的
    靶序列形成雙鏈體時的DNA合成的起始而不會阻止DNA的延伸,并且將
    阻礙從引物-引物二聚體或者引物-探針二聚體起始的DNA合成;和
    其中所述嵌合寡核苷酸中沒有兩個核糖核苷酸彼此相鄰。
    2.根據權利要求1所述的用途,其中進行核酸擴增反應的步驟使用
    為RNA/DNA嵌合寡核苷酸的至少一個引物和至少一個探針。
    3.根據權利要求1所述的用途,其中所述正向引物和所述反向引物
    都是RNA/DNA嵌合寡核苷酸。
    4.根據權利要求1所述的用途,其中在所述擴增反應中使用的所有
    的引物和探針均具有與3’末端堿基相同的堿基。
    5.根據權利要求4所述的用途,其中所述嵌合寡核苷酸的所述相同
    的堿基選自A或T。
    6.根據權利要求1所述的用途,其中與至少一個嵌合寡核苷酸的所
    述3’末端互補的堿基或者與所述互補堿基相鄰的堿基是核糖核苷酸。
    7.根據權利要求1所述的用途,其中在反應混合物中,每個嵌合寡
    核苷酸包含至少一個核糖核苷酸,所述核糖核苷酸位于和它本身3’末端或
    者另外一個引物或探針的3’末端互補的至少一個核苷酸處或者位于該核苷
    酸上游或下游1至5個核苷酸內。
    8.根據權利要求7所述的用途,其中在所述反應混合物中,每個嵌
    合寡核苷酸包含核糖核苷酸,所述核糖核苷酸位于和它本身3’末端或者另
    外一個引物或探針的3’末端互補的至少一個核苷酸處或者與該核苷酸相
    鄰。
    9.根據權利要求1-8所述的用途,其中所述DNA依賴性DNA聚合
    酶擴增反應選自由以下所組成的組:指數滾環擴增(ERCA)、滾環擴增
    (RCA)、多重置換擴增(MDA)、鏈置換擴增(SDA)、基于核酸序列的
    擴增(NASBA)、轉錄介導的擴增(TMA)、聚合酶鏈反應(PCR)、實時
    定量PCR(qPCR)、自主序列復制(3SR)、使用Qβ復制酶的擴增、和循
    環測序。
    10.根據權利要求9所述的用途,其中所述DNA依賴性DNA聚合酶
    擴增反應是實時定量PCR(qPCR)。
    11.根據權利要求1所述的用途,所述試劑盒還包括:
    實施所述擴增反應的必需試劑和緩沖劑。
    12.根據權利要求1所述的用途,其中所述試劑盒還包括檢測所述擴
    增反應的產物的工具。
    展開

專利技術附圖

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