1.至少一個RNA/DNA嵌合寡核苷酸作為正向引物或者作為反向引
物或者作為探針和DNA依賴性DNA聚合酶在制備用于在DNA依賴性
DNA聚合酶擴增反應中減少或消除人工產物和非特異性擴增產物形成的
試劑盒中的用途,
其中所述嵌合寡核苷酸包含至少一個核糖核苷酸;
其中位于所述嵌合寡核苷酸的3’末端或位于所述嵌合寡核苷酸的3’
末端的10個核苷酸以內的核糖核苷酸的數目將允許當所述引物和預期的
靶序列形成雙鏈體時的DNA合成的起始而不會阻止DNA的延伸,并且將
阻礙從引物-引物二聚體或者引物-探針二聚體起始的DNA合成;和
其中所述嵌合寡核苷酸中沒有兩個核糖核苷酸彼此相鄰。
2.根據權利要求1所述的用途,其中進行核酸擴增反應的步驟使用
為RNA/DNA嵌合寡核苷酸的至少一個引物和至少一個探針。
3.根據權利要求1所述的用途,其中所述正向引物和所述反向引物
都是RNA/DNA嵌合寡核苷酸。
4.根據權利要求1所述的用途,其中在所述擴增反應中使用的所有
的引物和探針均具有與3’末端堿基相同的堿基。
5.根據權利要求4所述的用途,其中所述嵌合寡核苷酸的所述相同
的堿基選自A或T。
6.根據權利要求1所述的用途,其中與至少一個嵌合寡核苷酸的所
述3’末端互補的堿基或者與所述互補堿基相鄰的堿基是核糖核苷酸。
7.根據權利要求1所述的用途,其中在反應混合物中,每個嵌合寡
核苷酸包含至少一個核糖核苷酸,所述核糖核苷酸位于和它本身3’末端或
者另外一個引物或探針的3’末端互補的至少一個核苷酸處或者位于該核苷
酸上游或下游1至5個核苷酸內。
8.根據權利要求7所述的用途,其中在所述反應混合物中,每個嵌
合寡核苷酸包含核糖核苷酸,所述核糖核苷酸位于和它本身3’末端或者另
外一個引物或探針的3’末端互補的至少一個核苷酸處或者與該核苷酸相
鄰。
9.根據權利要求1-8所述的用途,其中所述DNA依賴性DNA聚合
酶擴增反應選自由以下所組成的組:指數滾環擴增(ERCA)、滾環擴增
(RCA)、多重置換擴增(MDA)、鏈置換擴增(SDA)、基于核酸序列的
擴增(NASBA)、轉錄介導的擴增(TMA)、聚合酶鏈反應(PCR)、實時
定量PCR(qPCR)、自主序列復制(3SR)、使用Qβ復制酶的擴增、和循
環測序。
10.根據權利要求9所述的用途,其中所述DNA依賴性DNA聚合酶
擴增反應是實時定量PCR(qPCR)。
11.根據權利要求1所述的用途,所述試劑盒還包括:
實施所述擴增反應的必需試劑和緩沖劑。
12.根據權利要求1所述的用途,其中所述試劑盒還包括檢測所述擴
增反應的產物的工具。
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