1.一種綿羊miRNA在制備綿羊肌肉品質遺傳標記輔助育種試劑中的應用,其特征在于,
所述miRNA為miR-4749-5,序列為SEQ ID NO.1。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述miRNA的靶標基因是FAS。
3.根據權利要求1或2任意一項所述的應用,其特征在于,所述miRNA在優良肉用綿羊品
種的脂肪組織中低表達。
4.一種檢測miR-4749-5表達水平的熒光定量PCR試劑盒在制備綿羊肌肉品質遺傳標記
輔助育種試劑中的應用,其特征在于,miR-4749-5序列為SEQ ID NO.1。
5.根據權利要求4所述的應用,其特征在于,所述熒光定量PCR試劑盒組分包括:用于擴
增miR-4749-5的特異性引物、熒光定量PCR反應液。
6.根據權利要求5所述的應用,其特征在于,特異性引物是SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4
組成的引物對或者是SEQ ID NO.5。
7.一種通過檢測miR-4749-5檢測綿羊肌肉品質的方法,miR-4749-5序列為SEQ ID
NO.1,其特征在于,采用下列檢測方法中的一種或幾種:基于核苷酸雜交基礎上的方法、夾
板連接法、基于PCR基礎上的方法。
8.根據權利要求7所述的方法,其特征在于,所述檢測方法為加尾法和/或莖環法。
9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于,加尾法檢測miR-4749-5表達水平的步驟:
(1)提取綿羊脂肪組織中的小RNA;(2)通過polyA聚合酶和反轉錄酶進行miR-4749-5加尾和
反轉錄;(3)采用適用于加尾法的熒光定量PCR試劑盒進行miR-4749-5的擴增;莖環法檢測
miR-4749-5表達水平的步驟:(1)提取綿羊脂肪組織中的總RNA;(2)通過反轉錄引物在反轉
錄酶的作用下進行miR-4749-5反轉錄;(3)采用適用于莖環法的熒光定量PCR試劑盒進行
miR-4749-5的擴增。
10.權利要求7-9任意一項所述的方法在綿羊肌肉品質遺傳標記輔助育種中的應用。
展開