本發明提供了一種茄子花藥誘導培養基及配制方法。培養基的成分由大量元素、微量元素、鐵鹽及絡合劑、有機成分、無機添加物、植物生長調節劑、生理活性物質、碳源、凝固劑及其它添加物所組成。培養基的配制方法包括配制母液、制備生理活性物質、配制培養液、培養液加熱溶解與分裝、培養基高壓蒸汽滅菌、培養基加入IAA等步驟。本發明所述的培養基具有高效率地誘導茄子花藥產生花粉愈傷、培養基褐化輕的優點，可以顯著提高茄子花藥培養效率，加快茄子花培育種進程。

1.一種茄子花藥誘導培養方法，其特征在于：所采用的茄子花藥誘導培養基由以下組
分制成：
大量元素：KNO₃ 1900mg/L，NH₄NO₃ 1650mg/L，KH₂PO₄ 700mg/L，MgSO₄?7H₂O 375mg/L，
CaCl₂?2H₂O 440mg/L；
微量元素：MnSO₄?4H₂O 22.5mg/L，ZnSO₄?7H₂O 8.5mg/L，H₃BO₃ 12mg/L，KI0.8mg/L，CuSO₄
?5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂?6H₂O 0.025mg/L，Na₂MoO₄?2H₂O 0.25mg/L；
鐵鹽及絡合劑：FeSO₄?7H₂O 55mg/L，Na₂-EDTA?2H₂O 75mg/L；
有機成分：肌醇250mg/L，維生素B1 0.5mg/L，維生素B6 0.5mg/L，維生素C 8mg/L，煙酸
0.5mg/L，葉酸0.3mg/L，絲氨酸60mg/L，丙氨酸16mg/L；
無機添加物：AgNO₃ 8mg/L，活性炭1.8g/L；
植物生長調節劑：2，4-D 0.5mg/L，IAA 0.4mg/L，ZT 0.4mg/L；
生理活性物質：馬鈴薯提取液50g/L，椰乳25g/L；
碳源：葡萄糖50g/L，纖維二糖20g/L；
凝固劑及其它添加物：植物凝膠5g/L，甘露醇40g/L，水解蛋白1g/L；
茄子花藥誘導培養方法包括：
選擇茄子品種綠罐茄和博雜一號作為花藥培養供體，田間植株進入花期后，于晴天上
午9：00-11：00取盛花期花蕾，將花蕾用洗衣粉洗凈，以清洗附著在外植體上的灰塵和細菌，
再用流動的自來水沖洗，4℃低溫預處理；2天后取出花蕾，把花蕾用75%的酒精浸30S，再用
滴加1滴吐溫-20的0.1%的氯化汞溶液浸8min，取出后用無菌蒸餾水沖洗5次，然后在無菌條
件下剝出花藥接種于茄子花藥誘導培養基，暗培養4周，得到白色或淡綠色愈傷。
2.根據權利要求1所述的茄子花藥誘導培養方法，其特征在于：所述茄子花藥誘導培養
基的pH值為：5.6～6.0。
3.根據權利要求1所述的茄子花藥誘導培養方法，其特征在于：所述茄子花藥誘導培養
基的配制方法包括如下步驟：
（1）配制母液
大量元素、微量元素、鐵鹽及絡合劑母液分別配制成10、100、10倍的母液；肌醇單獨配
制成40倍母液，其它有機成分配制成500倍母液；IAA和ZT分別將稱量好后用少量無水酒精
溶解，然后用熱的蒸餾水定容，2，4-D稱量好后加入1mol/L的NaOH，磁力攪拌器攪拌10h即溶
解，2，4-D、ZT和IAA母液均配制成0.5g/L；所有母液預先配制，4℃冷藏保存備用，IAA需用棕
色容量瓶裝，避光保存；
（2）制備生理活性物質
馬鈴薯提取液的制備：將馬鈴薯塊莖洗凈后稱取50g，帶皮切成碎片，加入100ml蒸餾
水，煮沸20min，用4～6層紗布過濾靜置，待沉淀后將取上清液；
椰乳的提?。簩⑿迈r椰汁從椰殼中取出放入容器中，加熱至80℃，稍靜置后過濾至密封
塑料瓶中，-20℃冷藏保存備用；
（3）配制培養液
先在燒杯中加入一些蒸餾水，分別量取所需量的大量元素、微量元素、鐵鹽及絡合劑、
肌醇母液、有機成分母液加入燒杯中，將稱量好的AgNO₃、活性炭、蔗糖、纖維二糖、甘露醇、
水解蛋白、馬鈴薯提取液和椰乳加入燒杯中，攪拌溶解定容至1L后用pH計調節pH值；
（4）培養液加熱溶解與分裝
將稱量好的植物凝膠加入配好的培養液中，用電爐加熱至沸騰，邊加熱邊用玻璃棒攪
拌，直到液體呈透明狀后停止加熱，稍微冷卻后，按照25ml培養基/瓶分裝入100ml三角瓶
中，封口膜密封，扎緊；
（5）培養基高壓蒸汽滅菌
將三角瓶置于溫度為121℃、壓力為15kPa高壓蒸汽條件下滅菌20min，而后降溫至55℃
取出，置于超凈工作臺中；
（6）培養基內添加IAA
按照25ml培養基/瓶的用量計算需加入的IAA母液用量，無菌操作下加入已滅菌的IAA
母液，趁熱搖勻，密封后自然冷卻。
4.根據權利要求3所述的茄子花藥誘導培養方法，其特征在于：IAA母液的滅菌方法為：
用滅菌的0.22μm的微孔濾膜無菌操作，過濾滅菌。