本發明公開了一種克服三葉草品種基因型障礙高頻體胚再生培養基，包括幼苗生長馴化培養基、胚發生愈傷組織誘導培養基、胚繼代形成培養基和胚成熟萌發成苗培養基，幼苗生長馴化培養基為：1/2改良MS+20g/L白糖+0.7％瓊脂；胚發生愈傷組織誘導培養基為：改良SH+8～12mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+0.3％phytagel；胚繼代形成培養基為：改良SH+2～8mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L 6-BA+50g/L蔗糖+0.35％phytagel；胚成熟萌發成苗培養基為：改良MS+30g/L白糖+0.7％瓊脂。本發明可有效地克服三葉草高頻體胚再生培養中不同品種及基因型障礙問題，大幅度提高體細胞胚發生頻率和再生植株頻率，提高育種效率。

1.一種克服三葉草品種基因型障礙高頻體胚再生培養基，包括：幼苗生長
馴化培養基、胚發生愈傷組織誘導培養基、胚繼代形成培養基和胚成熟萌發成
苗培養基，其特征在于：
所述的幼苗生長馴化培養基為：1/2改良MS+20g/L白糖+0.7％瓊脂；
所述的胚發生愈傷組織誘導培養基為：改良SH+8～12mg/L?2，4-D+0.2～
0.5mg/L?6-BA+30g/L蔗糖+0.3％?phytagel；
所述的胚繼代形成培養基為：改良SH+2～8mg/L?2，4-D+0.2～0.5mg/L
6-BA+50g/L蔗糖+0.35％?phytagel；
所述的胚成熟萌發成苗培養基為：改良MS+30g/L白糖+0.7％瓊脂，
所述的改良SH和改良MS培養基都包括常量營養元素、微量營養元素和有
機試劑，
其中，改良SH包括的常量營養元素的組分和其對應的濃度如下：
硫酸銨????????????????463mg/L；
硝酸鉀????????????????2830mg/L；
二水氯化鈣????????????166mg/L；
七水硫酸鎂????????????185mg/L；
無水磷酸二氫鉀????????400mg/L；
乙二胺四乙酸鐵鈉鹽????1.4mg/L；
改良SH包括的微量營養元素的組分和其對應的濃度如下：
一水硫酸錳????????????10mg/L；
硫酸鋅????????????????1.0mg/L；
硼酸??????????????????5.0mg/L；
碘化鉀????????????????1.0mg/L；
鉬酸鈉????????????????0.1mg/L；
硫酸銅????????????????0.2mg/L；
氯化鈷????????????????0.1mg/L；
改良SH包括的有機試劑的組分和其對應的濃度如下：
鹽酸硫胺素???????????5.0mg/L；
煙酸?????????????????5.0mg/L；
鹽酸吡哆醇???????????5.0mg/L；
而所述的改良MS培養基包括的常量營養元素的組分和其對應的濃度如下：
硫酸銨?????????????1650mg/L；
硝酸鉀?????????????1900mg/L；
七水硫酸鎂?????????370mg/L；
無水磷酸二氫鉀?????170mg/L；
二水氯化鈣?????????440mg/L；
乙二胺四乙酸二鈉???37.3mg/L；
七水硫酸亞鐵???????27.8mg/L；
改良MS培養基包括的微量營養元素的組分和其對應的濃度如下：
四水硫酸錳???????????22.3mg/L；
硫酸鋅???????????????8.6mg/L；
硼酸?????????????????6.2mg/L；
碘化鉀???????????????0.83mg/L；
鉬酸鈉???????????????0.25mg/L；
硫酸銅???????????????0.025mg/L；
氯化鈷???????????????0.025mg/L；
改良MS培養基包括的有機試劑的組分和其對應的濃度如下：
鹽酸硫胺素?????????????1.0mg/L；
煙酸???????????????????1.0mg/L；
鹽酸吡哆醇?????????????1.0mg/L；
肌醇???????????????????100mg/L。