1.高效誘導哥倫比亞型擬南芥愈傷組織的培養基,其特征在于,用于將擬南芥子葉誘
導培養成愈傷組織,所述誘導培養基成分包括MS粉2.2-4.4g/L、2,4-二氯苯氧乙酸1-2mg/
L、蔗糖20-30g/L、瓊脂6-8g/L,pH值為5.6-5.8。
2.根據權利要求1所述的高效誘導哥倫比亞型擬南芥愈傷組織的培養基,其特征在于,
所述誘導培養基成分包括MS粉4.4g/L、2,4-二氯苯氧乙酸1.0mg/L、蔗糖20-30g/L、瓊脂6-
8g/L,pH值為5.6-5.8。
3.高效誘導哥倫比亞型擬南芥愈傷組織的方法,其特征在于,包括如下步驟:
1)按照權利要求1或2任一所述的配方配置誘導培養基;
2)外植體預處理及接種,在超凈工作臺上,用鑷子將生長良好的無菌實生擬南芥用解
剖刀切下葉片,并將切下的葉片置于步驟1)中配置的誘導培養基中;
3)愈傷組織的誘導,將步驟2)中接種好擬南芥子葉的誘導培養基置于溫室中,溫室培
養溫度為24-26℃、濕度為50-70%、光照強度為1500-2000lux、光照時間為16h,培養7-10天
后獲得淡黃色、顆粒狀的愈傷組織團塊。
4.按照權利要求3所述的高效誘導哥倫比亞型擬南芥愈傷組織的方法,其特征在于,還
包括增殖步驟,將培養10-15天后的愈傷組織在超凈工作臺上用鑷子剔除老化部分,挑取部
分愈傷組織接種到新的所述誘導培養基上,在一個培養基上接種多次并置于溫室中培養,
培養溫度為24-26℃、濕度為50-70%、光照強度為1500-2000lux、光照時間為16h,培養10-
15天后,即獲得大量淡黃色、顆粒狀的愈傷組織。
5.按照權利要求3或4任一所述的高效誘導哥倫比亞型擬南芥愈傷組織的方法,其特征
在于,所述生長良好的無菌實生擬南芥的培養方法包括如下步驟:
a)擬南芥種子消毒,在無菌超凈臺上,將哥倫比亞型擬南芥種子置于離心管中,首先用
體積分數75%的乙醇消毒30-60s后,使用滅菌水清洗一次,再使用體積分數11%的次氯酸
鈉振蕩消毒10-15min,最后用滅菌水洗3-5次;
b)生長培養基的配制,以MS培養基為基本培養基,成分包括MS粉2.2-4.4g/L、MES 0.5-
1g/L、蔗糖20-30g/L、瓊脂6-8g/L,pH值為5.6-5.8;
c)哥倫比亞型擬南芥的培養,將消毒完成的種子點于所述生長培養基上,置于4℃冰箱
春化2-3d后移到溫室中,溫室培養溫度為24-26℃、濕度為50-70%、光照強度為1500-
2000lux、光照時間為16h,9-10d后獲得哥倫比亞型擬南芥無菌實生苗。
6.按照權利要求3或4任一所述的高效誘導哥倫比亞型擬南芥愈傷組織的方法,其特征
在于,誘導所選的所述無菌實生擬南芥為已長出兩片完整葉子的擬南芥。
7.按照權利要求3或4任一所述的高效誘導哥倫比亞型擬南芥愈傷組織的方法,其特征
在于,用解剖刀切下擬南芥葉片時,切割位置在距兩片葉子結合處0.1cm的葉柄上。
8.按照權利要求3或4任一所述的高效誘導哥倫比亞型擬南芥愈傷組織的方法,其特征
在于,將擬南芥葉片接種到所述誘導培養基中時,葉面朝下接種。
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