1.一種芒屬植物芒荻雜種9號體胚組培快速繁殖方法,其步驟是:
A、幼穗選取:選取芒荻雜種9號處于穎花原基形成期的幼穗;
B、用初代誘導培養基誘導:將其剪成2-3厘米小段,先用75%體積比酒精消毒25-35s,然
后用0.1%質量體積比的氯化汞浸泡3-5min,再用無菌水沖洗2-4次,將其接種在幼穗的初
代誘導培養基上,經過28-30天的初代誘導,獲得胚性愈傷,培養條件為24-28℃,暗培
養,初代誘導培養基為:A:MS培養基附加激動素KT1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D3-
5mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR3g/L,或B:MS培養基附加激動素KT3-4mg/L,2,4二氯苯
氧乙酸2,4-D1-3mg/L,六水氯化鎂MgCl2·6H2O800mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR3g/L;
C、用生苗培養基繼代培養:所獲得的胚性愈傷在生苗培養基上繼代生苗,25-30天繼代一
次,增殖系數為3-4,培養條件為24-28℃,每天光照14-16個小時,光強為2000LX,所述
的生苗培養基配方為:MS培養基附加6-芐氨基腺嘌呤6-BA1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸
2,4-D1-2mg/L,六水氯化鎂MgCl2·6H2O800mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR3g/L,將胚性愈
傷轉到生苗培養基之后4-6天,愈傷開始轉綠,8-12天開始分化出芽,15-20天形成小幼
苗;
D、用生根誘導培養基誘導生根:所生幼苗在生根誘導培養基上誘導生根,培養25-30天,
培養條件為24-28℃,每天光照14-16個小時,光強為2000LX,生根誘導培養基為:1/2MS
培養基附加2,4二氯苯氧乙酸2,4-D0.5-2mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR3g/L,將長到5-10厘
米的幼苗轉到生根誘導培養基上,5天幼苗就會分化出白色或黃色的根;
E、馴化移栽:在溫室內,將生長健壯的、株高在5-6厘米的組培苗移栽到由沙土組成的馴
化苗圃中馴化,每天定期給幼苗噴施馴化培養液和清水,15-20d后,視幼苗長勢,移栽到苗
圃中,溫室條件為15℃-25℃,照明使用鹵光,光照14-16個小時,光照強度為2000LX,獲
得了芒荻雜種9號的幼苗。
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