本發明公開了一種柳杉無性系離體生根培養方法，包括以下步驟：1）對組織培養材料進行消毒和定瓶；2）將組織培養材料接入繼代增殖培養基進行繼代增殖培養，誘導分化出不定芽，然后將不定芽轉入MS培養基上進行伸長培養；其中，繼代增殖培養基配方為DCR+1.0mg/L？6-BA+0.05mg/L？NAA＋3%蔗糖；3）當不定芽伸長到2～3cm時，轉入誘導生根培養基培養，得生根試管苗；誘導生根培養基以1/2DCR+0.05~0.2mg/L？IBA+0.05~0.2mg/L？NAA＋蔗糖2%；4）移栽生根試管苗。該方法以萌條為組織培養材料，通過繼代增殖培養進行不定芽誘導；當不定芽伸長到2～3cm時，以1/2DCR為基本培養基，添加植物生長調節劑進行根誘導，通過本方法生根率平均為84%，最高可達93.3%，平均每株苗的生根數目達到5.7條，移栽成活率達平均86%以上。

1.一種柳杉無性系離體生根培養方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)選取柳杉優良無性系的當年生幼嫩萌條為組織培養材料，進行消毒和定瓶；
2)將組織培養材料接入繼代增殖培養基進行繼代增殖培養，誘導分化出不定芽，然后將不
定芽轉入MS培養基上進行伸長培養；其中，繼代增殖培養基配方為DCR+1.0mg/L6-
BA+0.05mg/LNAA+3％蔗糖；
3)當不定芽伸長到2～3cm時，轉入誘導生根培養基培養，得生根試管苗；誘導生根培養
基1/2DCR+0.05～0.2mg/LIBA+0.05～0.2mg/LNAA+蔗糖2％；
4)移栽生根試管苗，選用重量比為1:1的珍珠巖和泥炭混合后用作移栽基質，進行日常管
理，移栽成活；
其中，各培養基均附加瓊脂0.6％，培養溫度為25℃，光強為1500-2000lx，光照時間為
12h/d。
2.根據權利要求1所述的柳杉無性系離體生根培養方法，其特征在于，步驟1)中，截取
柳杉優良無性系當年生幼嫩萌條，除掉多余的葉片，用去離子水稀釋的洗滌劑浸泡30min
后，再用流水沖洗1h；在無菌條件下，用70％酒精浸泡90s，再經0.1％升汞分別處理
10min，然后用無菌水沖洗3-4次，每次1-2min；沖洗后將其置于培養皿中，無菌濾紙吸取
殘余水分后，切除莖段兩端受傷部位；然后將其切成2-3cm長的莖段，接種于已滅菌的MS
培養基上。
3.根據權利要求1所述的柳杉無性系離體生根培養方法，其特征在于，步驟1)中，所述
的柳杉無性系為柳杉011#、柳杉3#和柳杉70#。
4.根據權利要求1所述的柳杉無性系離體生根培養方法，其特征在于，步驟3)中，所述
的誘導生根培養基為1/2DCR+0.10mg/LIBA+0.20mg/LNAA+蔗糖2％。
5.根據權利要求1所述的柳杉無性系離體生根培養方法，其特征在于，步驟4)中，待試
管苗生根后，將株高3cm、根系發達的健壯幼苗在培養室內煉苗5-7d后，將根系附著的培
養基洗凈，移植到已滅菌的基質中，用塑料布蓋住，每天噴水2-3次，14d揭開塑料布，每
天噴水1-2次，定期觀察，50d后試管苗移栽成活。