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一種鉛綠褶菇子實體的生產方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-02
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200910038536.1 
  • 技術(專利)名稱 一種鉛綠褶菇子實體的生產方法 
  • 項目單位 廣東省微生物研究所
  • 發明人 李泰輝,林群英,鐘月金,宋斌,黃浩,鄧旺秋 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 楊萬忠
  • 發布時間 2021-12-02  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種鉛綠褶菇子實體的生產方法,其特征是將野生或人工栽培的鉛綠褶菇(Chlorophyllum molybdites(Meyer.:Fr.)Massee)子實體接種至斜面綜合PDA培養基分離培養,然后將擴大培養獲得的斜面母種在液體培養基上培養,再將得到的液體菌種在麥粒培養基上培養得到生產用的麥粒菌種,最后將其播種到生產用培養基料里培養,待菌絲長到培養基料面的2/3時覆土,20~25℃溫度下培養菌絲長至覆土層的2/3,再調節溫度至25~30℃,直至長出子實體,待子實體完全開傘,菌褶呈鉛綠色時采收,烘干得到產物。本發明鉛綠褶菇子實體的生物效率可達20~50%,即每1kg生產用培養料可得到200~500g新鮮的鉛綠褶菇子實體,可以滿足科學研究的需要。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種鉛綠褶菇子實體的生產方法,其特征包括以下的步驟:(1)將鉛綠褶菇(Chlorophyllum?molybdites(Meyer.:Fr.)Massee)子實體組織分離或多孢分離,然后接種至斜面綜合PDA培養基,23~30℃下培養,至菌絲長滿斜面,再以此作菌種按50~150g/L接種量擴大培養,得到能用于生產的鉛綠褶菇母種;所述的綜合PDA培養基的pH是6~7,其原料組成按質量份計,為已去皮去芽眼的馬鈴薯75~85份,葡萄糖6~10份,瓊脂6~10份,磷酸二氫鉀0.2~1.5份,硫酸鎂0.2~1.5份和VB1?0.002~0.006份,并通過下述方法制得:原料按所述組成分別稱重后,先將馬鈴薯切成小條放入鍋中,加入原料組成總質量3.5~4.5倍的水,煮沸20~30分鐘至馬鈴薯熟而不爛時,用6~8層紗布過濾,取濾汁于鍋中,補至原加水量后,加入瓊脂熔化,再加入葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和VB1攪拌均勻,趁熱裝于試管滅菌后,冷卻到45~50℃倒成斜面作接種用;(2)將步驟(1)得到的鉛綠褶菇母種按50~150g/L的接種量接種至液體培養基里,于溫度為22~30℃、搖速為110~150轉/分鐘、培養時間為7~12天,得到的菌液褐色,菌球黃豆大小,即為液體菌種,所述的液體培養基的pH為6~8,其原料組成按質量份計,為已去皮去芽眼的馬鈴薯88~91份,葡萄糖8.2~9.0份,KH2PO4?1.2~1.5份,MgSO4?0.6~0.75份和VB1?0.004~0.006份,并通過下述方法制得:原料按所述組成分別稱重后,先將馬鈴薯切成小條放入鍋中,加入原料組成總質量4.3~4.5倍的水,煮沸20~30分鐘左右至馬鈴薯熟而不爛時,用6~8層紗布過濾,取濾汁于鍋中,補水至原加水量后,加入葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和VB1,攪拌均勻,趁熱滅菌,冷卻后作接種用;(3)將步驟(2)得到的液體菌種按50~180mL/kg的接種量接種至麥粒培養基里,20~30℃培養30~45天,菌絲長滿培養基,正常菌絲呈白色,即得到生產用的麥粒菌種,所述的麥粒培養基為pH?11~12,按其原料組成總質量分數100%計,為小麥30%~50%,棉子殼30%~50%,麩皮10%~20%,碳酸鈣0.5%~1.2%,石膏0.5%~1.2%,磷酸二氫鉀0.3%~1%和石灰0.5~1.2%,并由下述方法得到:原料按所述組成分別稱重后,先把小麥浸泡20~30小時,再用自來水沖洗干凈,用鍋煮熟20~38分鐘,過濾滴干拌入其它組份混合拌均,此時含水量為50%~60%,裝入培養瓶里滅菌,冷卻后作接種用;(4)將步驟(3)得到的生產用的麥粒菌種按培養基質量5%~18%的播種量播種到經過堆料發酵得到的生產用培養基里,于溫度20~30℃,空氣相對濕度50%~70%,暗培養至菌絲白色粗壯長滿到培養料的2/3時,則進行覆土,覆土層的厚度1~1.5cm,于溫度20~25℃、光照200~500Lx下培養至菌絲長至覆土層的2/3,再調節培養溫度至25~30℃,濕度70%~90%,從播種起計算培養時間為50~100天可長出原基,所述的生產用培養基其原料按總質量分數100%計,由培養基料30%~50%和水50%~70%組成,所述的培養基料按總質量分數100%計,由稻草88%~90%,花生麩3%~5%,尿素0.5%~1%,硫酸銨0.5%~1%,磷肥1%~2%,石膏0.5%~1%,石灰1%~2%和多菌靈0.5%~1%組成;(5)步驟(4)長出原基繼續培養1~3天,子實體長高至完全開傘,菌褶呈鉛綠色時采收,烘干得到產物。2.根據權利要求1所述的一種鉛綠褶菇子實體的生產方法,其特征是步驟(1)中所述的將鉛綠褶菇子實體組織分離或多孢分離,然后接種至斜面綜合PDA培養基的接種量為50~150g/L,培養溫度24~26℃,培養時間16~25天,所述的綜合PDA培養基的pH是6.5~6.8,其原料組成按質量份計,是去皮去芽眼馬鈴薯78~83份,葡萄糖7~9份,瓊脂7~9份,磷酸二氫鉀0.5~1份,硫酸鎂0.5~1份和VB10.003~0.005份,加入原料組成總質量4.42倍的水;步驟(2)中所述的接種量是100g/L,所述培養溫度為24~26℃,轉速120~130轉/分鐘,培養時間9~10天,所述的液體培養基為pH?7,其原料組成按質量份計,為已去皮去芽眼的馬鈴薯89.083份,葡萄糖8.908份,KH2PO41.336份,MgSO40.668份和VB10.005份,加入原料組成總質量4.454倍的水;步驟(3)所述的接種量為100~120mL/kg,培養溫度是24℃~26℃,培養時間是35~40天,所述的麥粒培養基pH?12,按其原料組成總質量分數100%計,為小麥40%~41%,棉子殼40%~41%,麩皮15%~17%,碳酸鈣0.9%~1%,石膏0.9%~1%,磷酸二氫鉀0.4%~0.5%和石灰0.9%~1%,所述小麥浸泡時間20~24小時,煮熟時間為25~30分鐘,小麥過濾滴干拌入其它組份混合拌勻含水量為55%;步驟(4)中所述的播種量是培養基質量8%~10%,從播種至長出原基的培養時間為60~65天,所述的生產用培養基的堆料發酵方法是先將稻草切成3~4段,每段15cm,然后用水浸泡24小時,建堆時將稻草鋪約15~45cm厚,均勻地撒上已預濕好的花生麩,尿素和磷肥,堆料溫度40~45℃,堆料5天進行第一次翻堆,并加入80%~90%的石灰,保持40~45℃繼續發酵,10天后進行第二次翻堆,并加入硫酸銨,15天后第三次翻堆,20天后第四次翻堆時加入多菌靈和剩余的石灰,調節pH至7~7.5,次日拆堆,翻勻,然后用于播種;所述的播種采用分層撒混播,先把2/3的生產用的麥粒菌種均勻撒在生產用培養基料面上,抓料抖動,使生產用的麥粒菌種均勻地分布在培養基2/3料層中,稍為平整培養基面,再把剩余的的生產用的麥粒菌種均勻混播在培養基上面1/3的料層里,不要讓菌種外露,每天通氣1~2次,每次0.5~1小時;所述的覆土是先把曬干的菜園土用質量分數2%的石灰水和質量分數0.1~0.2%的多菌靈調至含水量為質量分數50%~70%,拌勻后用塑料膜蓋上2~4天,然后曬干,覆土時用質量分數2%~3%的石灰水吸土2~5分鐘,滴干后才覆上,覆土后蓋上塑料膜;步驟(5)中所述的烘干溫度是45~55℃。
    展開

專利技術附圖

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