本發明公開了一種紫花苜蓿高效組織培養再生方法，其依次包括有如下步驟：(1)無菌苗的培養；(2)將紫花苜蓿無菌苗葉片接種于愈傷誘導培養基中培養；(3)將愈傷組織轉入繼代培養基1中進行培養；(4)將要長出綠色芽點的愈傷組織轉入愈傷組織繼代培養基2中進行繼代培養(5)挑選生長狀態好的愈傷組織轉入分化培養基中進行分化培養；(6)待分化出苗后轉入生根培養基中進行生根培養。本發明的優點在于：本發明通過添加合適劑量的TDZ和連續繼代實現了紫花苜蓿組織培養中植株的高效再生，應用本發明方法可以提高紫花苜蓿愈傷組織分化率，比現有技術的分化率平均高出12.3％。該方法操作簡單、植株再生成功率高。本發明為進一步利用基因工程對其進行遺傳改良奠定了基礎。

1.紫花苜蓿高效組織培養再生的方法，其依次包括有如下步驟：(1)無菌苗的培養；(2)
將紫花苜蓿無菌苗葉片接種于愈傷誘導培養基中培養；(3)將愈傷組織轉入繼代培養基1中進
行培養；(5)挑選生長狀態好的愈傷組織轉入分化培養基中進行分化培養；(6)待分化出苗后轉
入生根培養基中進行生根培養；其特征在于：在所述步驟(3)和步驟(5)之間增加步驟(4)，其中
步驟(4)是將步驟(3)經愈傷組織轉入繼代培養基1中進行培養后，即將要長出綠色芽點的愈傷
組織轉入愈傷組織繼代培養基2中進行繼代培養5-8天；其中所述愈傷組織繼代培養基2：
MS+0.01-0.5mg/L?TDZ+20g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂，PH值：5.8-6.0；愈傷組織繼代培養基1：
MSO+0.5mg/L?NAA+0.5mg/L?6-BA+1.0mg/L?AgNO₃+20g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂。