1.一種氟碳乳劑應用于細胞復氧的模型建立方法,其特征在于,通過攜氧的氟碳乳劑
作用于細胞,研究外源性的攜氧物質對細胞缺氧以后復氧效果的影響;
包括如下步驟:
a.缺氧模型的建立:采用自制的密閉盒子,保留一個進氣口與出氣口,細胞培養到一定
濃度后,將細胞培養皿或培養板放入密閉盒子,然后在進氣口通入氮氣;
b.將盒子放入37攝氏度培養箱中培養一段時間;
c.將氟碳乳劑與培養基混合,配成不同濃度的氟碳溶液;
d.將缺氧后的細胞取出,吸去原培養基,分別換上c中所配的含氟碳培養基及不含氟碳
的培養基,在正常氧含量條件下復氧;
e.設置一個對照組,始終在正常氧氣條件下培養,最后通過一定的表征手段檢測細胞
在氟碳乳劑作用下復氧的變化;
所述自制的密閉盒子,其進氣口在上方,出氣口在下方,這樣能更有效的排盡盒子內的
氧氣;
所述細胞放入密閉盒子做缺氧處理前,將培養基換成無血清培養基,以達到更好的缺
氧效果;
所述密閉盒子中通氮氣前,在盒內敞口放一培養皿的水,以保證盒內足夠的濕度,使實
現結果更有效;
所述氮氣通氣時間在10分鐘以上;
所述缺氧培養時間為4-24小時;
所述步驟c中的氟碳溶液濃度以氟碳含量計控制在0.05mg/ml-1mg/ml之間,過低濃度
沒有效果,過高濃度會對細胞造成過大傷害,影響實驗結果;
所述復氧時間為2-12小時。
2.根據權利要求1所述一種氟碳乳劑應用于細胞復氧的模型建立方法,其特征在于,所
述步驟e中的表征手段為檢測細胞活性,細胞活性氧自由基含量,細胞內蛋白的表達等其中
的至少一種。
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