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一種毛竹胚乳培養的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-08-15
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201510566151.8 
  • 技術(專利)名稱 一種毛竹胚乳培養的方法 
  • 項目單位 中國林業科學研究院亞熱帶林業研究所
  • 發明人 袁金玲,顧小平,岳晉軍,吳曉麗 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 衛宜凡
  • 發布時間 2021-08-15  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種毛竹Phyllostachys edulis胚乳培養的方法,它是通過對毛竹未成熟胚乳進行適宜消毒后,首先在誘導培養基上形成愈傷組織,然后在增殖培養基上繼代,繼而在分化培養基上形成再生植株,最后經壯苗培養、煉苗后移栽成活。本發明解決了毛竹胚乳培養的技術難題,為實現毛竹的倍性育種提供了技術支撐,也為其他竹類植物的相關研究提供了有價值的參考。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種毛竹Phyllostachys edulis胚乳培養的方法,其特征在于:由以下步驟組成:外
    植體的制備和消毒,外植體接種及愈傷組織誘導,愈傷組織的分化成苗,以及壯苗、煉苗和
    移栽過程,具體步驟如下:
    (1)外植體的制備和消毒:對開花毛竹進行人工授粉,于授粉后30-40d取發育飽滿的種
    子,放入存有冰袋的保溫箱中冷藏,運至實驗室,用4℃預冷的75%乙醇消毒1min;然后用4
    ℃預冷的0.2%的次氯酸鈉消毒20-25min,期間不斷振蕩;最后用4℃預冷的無菌水沖洗5-7
    遍,用無菌紙吸干表面水分,備用;
    (2)外植體接種及愈傷組織誘導:取消毒好的外植體,用鑷子小心地剝去內外稃片,然
    后用鑷子輕輕擠壓種胚使胚乳擠出,將胚乳接種到愈傷組織誘導培養基上,于4℃冰箱中過
    夜,次日置于26℃暗培養10-20d使胚乳上形成愈傷組織,每20-30d將愈傷組織在相同培養
    基上繼代一次;愈傷組織誘導培養基是以MS培養基為基礎,添加1-5mg/L的2,4-D、0.3-
    1.0mg/L的ZT、500mg/L的脯氨酸、500mg/L的谷氨酰胺、300mg/L的水解酪蛋白、15g/L的葡萄
    糖、20g/L的蔗糖、10g/L的麥芽糖、8g/L的瓊脂粉,滅菌前調整pH=5.8;
    (3)愈傷組織的分化:將胚乳愈傷組織接種到分化培養基上,26℃光培養20-30d,光照
    時間12h/d,光照強度1000-1500lux,部分愈傷組織分化成苗,形成再生植株;分化培養基是
    以MS培養基為基礎,添加0.5-2.0mg/L的ZT、0.5-2.0mg/L的IBA、0.5-2.0mg/L的NAA、30g/L
    的麥芽糖、8g/L的瓊脂:
    (4)壯苗、煉苗和移栽:將再生的小植株接種到壯苗培養基上培養30-40d,開瓶煉苗5-
    10d,取出小苗清洗根部的培養基,再用0.1%的高錳酸鉀溶液清洗根部,然后將小苗栽植到
    滅菌的介質中,遮陰散射光培養一個月后,幼苗成活;壯苗培養基是以MS培養基為基礎,添
    加1-4mg/L的NAA、0.2-0.5mg/L的TDZ、8g/L的瓊脂、30g/L的蔗糖。
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專利技術附圖

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