本發明公開了一種貴州半蒴苣苔的離體保存方法，包括貴州半蒴苣苔的組培快繁，再利用組培快繁得到的叢生芽分化壯苗產生的具有4～6片葉的試管苗，接種到保存培養基進行離體保存，本發明保存培養基為1/2MS+CCC1.0mg/l+AC0.3％+蔗糖3.5％+瓊脂0.4％。培養基培養基的pH值為5.8，溫度為18±1℃，光照強度1400～1600lx，光照時間為8～10小時/天。利用本發明的方法可以使貴州半蒴苣苔種質資源得到長期的保存，并且得到的種苗健壯、成活率高，可在短期內提供大量貴州半蒴苣苔的優質種苗，有效解決了貴州半蒴苣苔種質資源保存及規模化育苗問題。

1.一種貴州半蒴苣苔的離體保存方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)外植體誘導培養：取野外采集的貴州半蒴苣苔的頂芽作為外植體，在70％乙醇中浸
泡30～45s，無菌水沖洗2～3次，投入添加2％吐溫-20的0.1％升汞4min，再用無菌水沖洗2
～3次，再次投入添加2％吐溫-20的0.1％升汞4min，最后用無菌水沖洗2～3次后切割為0.5
～1.0cm長接種在接種培養基上，培養10～14天，頂芽分化形成嫩黃綠色叢生芽；所述的接
種培養基為：MS+6-BA1.0mg/l+NAA0.4mg/l+KT0.4mg/l+蔗糖3.5％+瓊脂0.4％；所述培養基
的pH值為5.8，培養溫度為24～28℃，光照強度1400～2000lx，光照時間為12～14小時/天；
(2)叢生芽壯苗生根培養：經25～35天，叢生芽長至2～3cm，轉入生根培養基培養1個月
后，長成具根和4～6片葉的試管苗；所述的生根培養基為：MS+IAA0.6mg/l+ABT 0.5mg/l+
AC0.8％+蔗糖3.5％+瓊脂0.4％；所述培養基的pH值為5.8，溫度為22～25℃，光照強度2600
～2800lx，光照時間為12～14小時/天；
(3)試管苗離體保存：將由叢生芽分化產生的具有4～6片葉的試管苗，接種到保存培養
基進行離體保存；所述的保存培養基為1/2MS+CCC1.0mg/l+AC0.3％+蔗糖3.5％+瓊脂
0.4％；所述培養基的pH值為5.8，溫度為18±1℃，光照強度1200～1600lx，光照時間為6～8
小時/天。