本發(fā)明提供了一種金花葵愈傷組織的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：將金花葵種子浸種后吸干種子表面的水分，然后采用氯氣消毒；將消毒后的種子接種在無菌苗培養(yǎng)基上，接種后放置于恒溫黑暗環(huán)境中，使種子萌發(fā)，萌發(fā)后移至恒溫溫室中繼續(xù)生長；選取接種后的無菌苗的子葉和真葉為外植體，切去葉片邊緣后放置在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上并用鈍頭鑷子輕按葉片表面使其緊貼誘導(dǎo)培養(yǎng)基表面，用雙層石蠟封口膜封口；外植體接種后放置在恒溫生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)至出現(xiàn)愈傷組織；切下愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)至愈傷組織生長達(dá)到穩(wěn)定期，完成培養(yǎng)。本發(fā)明提供的培養(yǎng)方法中利用無菌苗子葉為外植體和適宜的激素濃度來縮短培養(yǎng)周期。

1.一種金花葵愈傷組織的培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟：(1)、種子消毒：
將金花葵種子在50℃恒溫水浴鍋中浸泡30min后吸干種子表面的水分，然后采用氯氣
消毒4h；
(2)、將消毒后的種子接種在無菌苗培養(yǎng)基上，接種后放置于恒溫黑暗環(huán)境中，使
種子萌發(fā)，萌發(fā)后移至恒溫溫室中繼續(xù)生長；所述無菌苗培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基、蔗糖和
瓊脂組成，pH為5.8～6.0；
(3)、選取播種后10～15天的無菌苗的子葉和真葉為外植體，切去葉片邊緣后放
置在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上并用鈍頭鑷子輕按葉片表面使其緊貼誘導(dǎo)培養(yǎng)基表面，用雙層石蠟封
口膜封口；
(4)、外植體接種后放置在28℃恒溫生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)至出現(xiàn)愈傷組織；
(5)、切下愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)至愈傷組織生長達(dá)到穩(wěn)定
期，完成培養(yǎng)；所獲得的愈傷組織形態(tài)穩(wěn)定，用于研究多倍體育種和細(xì)胞學(xué)實驗；
上述步驟中所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基和繼代培養(yǎng)基成分相同，由MS培養(yǎng)基、2,4-D、6-BA
以及KT組成，pH為5.8～6.0，其中2,4-D濃度為2.1mg/L，6-BA濃度為0.75mg/L，
KT濃度為2.0mg/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金花葵愈傷組織的培養(yǎng)方法，其特征在于：步驟(2)中
無菌苗培養(yǎng)基位于錐形瓶中，其厚度為0.5cm；錐形瓶選擇50mL、100mL或250mL規(guī)
格，50mL和100mL錐形瓶接種1～2粒種子，250mL錐形瓶接種3～6粒種子，所述無
菌苗培養(yǎng)基中蔗糖的濃度為30g/L，瓊脂的濃度為8g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金花葵愈傷組織的培養(yǎng)方法，其特征在于：步驟(2)中
培養(yǎng)溫度為25℃。