一種二十年生木荷大樹(shù)高效離體繁殖方法，采用二十年生木荷大樹(shù)上生長(zhǎng)的腋芽莖段為外植體，經(jīng)消毒滅菌后，接種于啟動(dòng)培養(yǎng)基中，先放置于黑暗條件下培養(yǎng)7-12d，再放置于普通日光燈下，每日光照16h，溫度23-25℃、濕度50％-60％，培養(yǎng)40d分化長(zhǎng)成試管芽苗；將長(zhǎng)成的試管芽苗剪切、轉(zhuǎn)接于經(jīng)高壓滅菌的增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，然后再將增殖的試管芽苗剪切后接種于經(jīng)高壓滅菌的壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，32d后剪除基部愈傷組織和部分葉片，保留3-4片葉片，接種于經(jīng)高壓滅菌的生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)12-15d，取出清洗，移栽到含有泥炭、黃心土、珍珠巖的混合基質(zhì)中，其體積比為泥炭∶黃心土∶珍珠巖＝2∶1∶1，25d后生根成活，生根率達(dá)96％以上。

1.一種二十年生木荷大樹(shù)高效離體繁殖方法，其特征是按下列步驟進(jìn)行：?(1)、準(zhǔn)備基本培養(yǎng)基，每升基本培養(yǎng)基中含有：四水硝酸鈣371-556mg，硝酸銨268-400mg，硫酸鉀600-900mg，七水硫酸鎂248-370mg，磷酸二氫鉀115-170mg，二水氯化鈣70-96mg，四水硫酸錳22.5mg，七水硫酸鋅8.6mg，硼酸6.2mg，五水硫酸銅0.25mg，二水鉬酸鈉0.25mg，七水硫酸亞鐵41.0mg，乙二胺四乙酸鈉56.0mg，維生素B₁1.0mg，維生素B₆0.5mg，VB₅0.5mg，甘氨酸2.0mg，肌醇90mg，蔗糖20000mg，卡拉膠6500mg;(2)、采用經(jīng)選育的二十年生木荷大樹(shù)優(yōu)良單株的腋芽莖段為外植體，經(jīng)70％酒精消毒20-35s，再用添加1-2滴吐溫20／100ml的0.1％的升汞溶液滅菌9-13min，用無(wú)菌水沖洗3-5次；?(3)、在超凈的工作臺(tái)上，無(wú)菌條件下，將消毒的外植體接種在經(jīng)消毒的含有啟動(dòng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，先將其置于黑暗條件下7-12d后，再置于普通日光燈為光源、光照強(qiáng)度為1500-20001x下，每日光照16h，溫度23-25℃、濕度為50％-60％，培養(yǎng)40d，分化長(zhǎng)成試管芽苗；?所述的啟動(dòng)培養(yǎng)基為：每升基本培養(yǎng)基含：玉米素0.5-1.5mg、6-芐基嘌呤1.0-2.5mg和吲哚丁酸0.01-0.1mg；?(4)、將從(3)步中長(zhǎng)成的芽苗，剪切，轉(zhuǎn)接于經(jīng)消毒的含有增殖培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，不斷增殖，視繁殖規(guī)模達(dá)1000瓶進(jìn)入下一步；?所述的增殖培養(yǎng)基為：每升基本培養(yǎng)基含：玉米素1.0-1.5mg、6-芐基嘌呤1.5-2.5mg、吲哚丁酸0.01-0.05mg和檸檬酸80-100mg；?(5)、將(4)步中培養(yǎng)的試管芽苗，剪切、接種于經(jīng)消毒的含有壯苗培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，32d后進(jìn)入下一步；?所述的壯苗培養(yǎng)基為：每升基本培養(yǎng)基含：玉米素0.5-1.0mg、6-芐基嘌呤1.0-1.5mg、吲哚丁酸0.05-0.1mg和檸檬酸80-100mg；?(6)、將(5)步中的試管壯苗，剪除基部愈傷組織和部分葉片，保留3-4片葉片，接種于經(jīng)消毒的含有生根培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，進(jìn)行生根培養(yǎng)12-15d；?所述的生根培養(yǎng)基為：每升基本培養(yǎng)基含：α-萘乙酸0.3-0.5mg、吲哚丁酸0.5-1.0mg、檸檬酸100-150mg和硝酸鑭8-10mg；?(7)、將(6)步中生長(zhǎng)的帶有根的小苗，取出清洗，移栽到含有泥炭、黃心土、珍珠巖體積比為泥炭：黃心土：珍珠巖=2：1：1的基質(zhì)中，澆透水，保持溫度25-28℃，相對(duì)濕度85％以上，前10d遮光70％，后逐漸見(jiàn)光，25d后生根成活，生根率達(dá)96％以上，50d左右，全光照。?