本發明公開了一種生石花無菌播種及再生體系建立的方法，具體操作步驟如下：1）培養基的配制，包括基本培養基和組培各階段培養基的組分；2)種子消毒及接種；3）愈傷組織的誘導及分化；4）不定芽的增殖；5）壯苗培養。本發明有益的效果：本發明利用植物組織培養技術對生石花進行無菌播種及再生快繁，能夠在短時間內獲得大量遺傳性狀一致的優質壯苗，克服了常規繁殖方法慢的缺點，對其規模化生產和種質資源收集及保存都具有積極意義。

1.一種生石花無菌播種及再生體系建立的方法，其特征在于：該方法包括如下步驟：
1)、培養基的配制：
(1)基本培養基：MS或1/2MS，其中蔗糖20～30g/L，瓊脂5～9g/L，pH＝5.8；
(2)誘導培養基：MS+6-BA?0.1～0.5mg/L+NAA0.05～0.1mg/L；
(3)分化培養基：MS+6-BA?0～0.05mg/L；
(4)增殖培養基：MS+6-BA?0.05～0.3mg/L+NAA0.05～0.1mg/L；
2)種子的消毒及接種：以生石花的種子為外植體材料，將消毒處理后的種子在無菌條件
下接種于誘導培養基上培養；具體步驟為：以生石花的種子為外植體材料，將其置于1.5ml
或2ml的PE離心管中進行消毒處理，先用洗潔精溶液浸泡0.5h后再用自來水清洗，然后依
次在體積比為70％的酒精溶液和有效氯濃度為1％的次氯酸鈉溶液中分別浸泡30s和6
min，最后用無菌水沖洗3～5遍，每遍2min；
3)愈傷組織的誘導及分化：將步驟2)種子萌發后誘導愈傷組織形成并進行不定芽的分
化培養；具體步驟為：種子培養2～4周后陸續萌發，萌發后的生石花在誘導培養基上培養2～3
周后有愈傷組織形成，挑取生長狀態較好的愈傷組織置于分化培養基上培養，4周后愈傷組
織開始分化不定芽；
4)不定芽的增殖：將步驟3)的不定芽叢接種于增殖培養基上進行增殖培養；
5)壯苗培養：將步驟4)不定芽分成單株后轉至基本培養基上進行壯苗培養。
2.根據權利要求1所述的生石花無菌播種及再生體系建立的方法，其特征在于：在所述
步驟5)中，不定芽分成單株后轉至基本培養基上進行壯苗培養，培養2～4周后成為具有根
系的壯苗。
3.根據權利要求1所述的生石花無菌播種及再生體系建立的方法，其特征在于：在所述
步驟3)、4)、5)中，所述的培養條件是，培養溫度為23±2℃、光照強度為60～100μmol·m^-2·s^-1、
光照時間為10～16小時/天。