1.一種巖黃連組織培養快速繁殖方法,其特征在于:該方法包括以下步驟:
(1)外植體的選擇與消毒:取巖黃連側芽作為外植體,依次用2%洗潔精水溶液浸泡
5-15min,線狀自來水沖洗10-20min,添加了2-3滴吐溫-20的100毫升0.1%升汞消毒
8-10min,無菌水沖洗3-5次,最后用消毒濾紙吸去表面水分,得到外植體,其中無菌水為
經高壓滅菌的蒸餾水;
(2)側芽分化獲得叢生芽快速繁殖培養:將步驟(1)得到的外植體接種到MS培養基
中,在培養溫度為23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下
培養30天,側芽分化后獲得叢生芽,其中MS培養基中添加0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.5mg/L
的NAA、0.1-0.5mg/L的KT、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養基的pH值為5.8;
(3)叢生芽壯苗培養:將步驟(2)中得到的叢生芽置于MS壯苗培養基中,在培養溫
度23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養40天得到
健壯植株,其中MS壯苗培養基中添加0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.5mg/L的IAA、25-30g/L
蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養基的pH值為5.8;
(4)健壯植株生根培養:將步驟(3)中得到的健壯植株置于1/2MS生根培養基中,在
培養溫度23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養40
天得到帶根的完整植株,其中1/2MS生根培養基中添加0.5-1.5mg/L的IAA、0.5-1.5mg/L
的IBA、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養基的pH值為5.8;
(5)煉苗與移栽:步驟(4)獲得帶根的完整植株后,在室溫為25℃的室內打開瓶蓋,
煉苗2-4天,洗凈根部培養基,立即移栽到通風良好且弱光沙土壤中,在沙土壤中生長一個
半月后移栽大田。
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