本發(fā)明提供了一種電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，包括制備感受態(tài)細(xì)胞和電擊轉(zhuǎn)化兩個(gè)步驟；其中，制備感受態(tài)細(xì)胞包括如下步驟：將枯草芽孢桿菌在LB培養(yǎng)基中活化，將活化后的枯草芽孢桿菌接種于SLB培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)至OD=0.7；SLB培養(yǎng)基的制備方法為：將10g蛋白胨，5g酵母粉，10gNaCl，0.5mol山梨醇和蒸餾水充分混勻，并用蒸餾水定容至1L；電擊轉(zhuǎn)化包括如下步驟：將待轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒與所述感受態(tài)細(xì)胞混勻并冰浴，進(jìn)行電擊，得到導(dǎo)入所述待轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的重組枯草芽孢桿菌。應(yīng)用本發(fā)明的方法，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)8×10cfu/μg，大大提高了枯草芽孢桿菌的轉(zhuǎn)化效率。

1.一種電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，包括制備感受態(tài)細(xì)胞和電擊轉(zhuǎn)化兩個(gè)步驟；其中，所述制備感受態(tài)細(xì)胞依次包括如下步驟：將枯草芽孢桿菌在LB?培養(yǎng)基中活化，將活化后的枯草芽孢桿菌接種于SLB?培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)至OD600nm=0.7?；所述SLB?培養(yǎng)基的組分為：1%（W/V）蛋白胨，0.5%（W/V）酵母粉，1%（W/V）NaCl，0.5mol/L?山梨醇，其余為蒸餾水；所述電擊轉(zhuǎn)化包括如下步驟：將待轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒與所述感受態(tài)細(xì)胞混勻并冰浴，進(jìn)行電擊，得到導(dǎo)入所述待轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的重組枯草芽孢桿菌；其中，所述待轉(zhuǎn)化質(zhì)粒與所述感受態(tài)細(xì)胞的配比為：80-120ng?所述待轉(zhuǎn)化質(zhì)粒：6×10^8?個(gè)感受態(tài)細(xì)胞；所述待轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒為穿梭載體pHY-P43?或plaB-p43；所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌WB600?或WB700。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于：所述電擊轉(zhuǎn)化還包括在所述電擊后進(jìn)行如下處理的步驟：向電擊杯中加入1ml?ORM?培養(yǎng)基并混勻，振蕩培養(yǎng)；所述ORM?培養(yǎng)基的組分如下：1%（W/V）蛋白胨，0.5%（W/V）酵母粉，1%（W/V）NaCl，0.7-0.9mol/L?山梨醇，其余為蒸餾水。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于：所述ORM?培養(yǎng)基中山梨醇的濃度為0.8mol/L。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于：所述電擊轉(zhuǎn)化還包括在所述電擊前進(jìn)行如下處理的步驟：將制備的感受態(tài)細(xì)胞用SMG?緩沖液吹懸；所述SMG?緩沖液的組分如下：0.5mol/L?山梨醇，0.5mol/L?甘露醇，10%（W/V）甘油，其余為去離子水。5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于：所述電擊轉(zhuǎn)化中，電擊的電壓為18-21kv/cm。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于：所述電擊轉(zhuǎn)化中，電擊的電壓為18-21kv/cm。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于：所述電擊轉(zhuǎn)化中，電擊的電壓為21kv/cm。8.根據(jù)權(quán)利要求6?所述的電擊轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于：所述電擊轉(zhuǎn)化中，電擊的電壓為21kv/cm。