本發明公開了一種毛葡萄莖尖的包埋干燥超低溫保存方法，其特征在于：包括以下步驟：(1)莖尖包埋干燥超低溫冷凍保存：取繼代腋芽飽滿的組培苗，在光照低溫鍛煉，后剝取組培苗腋芽莖尖，制成莖尖包埋丸，再將包埋丸在蔗糖固體培養基中預培養，干燥后的莖尖包埋丸置于液氮中冷凍24 h以上；(2)解凍及恢復后再生培養：莖尖包埋丸冷凍保存后，解凍，然后取包埋丸莖尖接種到恢復培養基上進行恢復培養和繼代培養得到再生莖尖;(3)生根培養：取步驟二中的再生莖尖置于生根培養基中進行生根培養；(4)煉苗移栽：將培養30?40d的生根苗的根部清洗，KMnO浸根，移栽至盛有滅菌蛭石的營養缽中用1/8MS營養液澆灌，然后放入培養室培養2?3 d后澆灌殺菌劑，待地上部葉色加深后轉移到盛有營養土的營養缽中繼續溫室鍛煉，生長2~3個月左右，翌年春移栽大田。

1.一種毛葡萄莖尖的包埋干燥超低溫保存方法，其特征在于：包括以下步驟：（1）莖尖包埋干燥超低溫冷凍保存：取繼代腋芽飽滿的組培苗，在光照低溫鍛煉，后剝取組培苗腋芽莖尖，制成莖尖包埋丸，再將包埋丸在蔗糖固體培養基中預培養，干燥后的莖尖包埋丸置于液氮中冷凍24 h以上；（2）解凍及恢復后再生培養：莖尖包埋丸冷凍保存后，解凍，然后取包埋丸莖尖接種到恢復培養基上進行恢復培養和繼代培養得到再生莖尖； （3）生根培養：取步驟二中的再生莖尖置于生根培養基中進行生根培養；（4）煉苗移栽：將培養30-40d的生根苗的根部清洗，KMnO₄浸根，移栽至盛有滅菌蛭石的營養缽中用1/8MS營養液澆灌，然后放入培養室培養2-3 d后澆灌殺菌劑，待地上部葉色加深后轉移到盛有營養土的營養缽中繼續溫室鍛煉，生長2~3個月，翌年春移栽大田；步驟（1）中用于剝取莖尖的組培苗需繼代60 d且腋芽飽滿，并需在光照條件下溫度為10±1℃鍛煉14 d；步驟（1）中莖尖包埋丸的制備及其預培養步驟：莖尖投入含有2M甘油、0.4M蔗糖和2.5%海藻酸鈉的MS溶液中，然后吸取含有一個莖尖的液體轉移到含有2M甘油、0.4M蔗糖和0.1M CaC_l2的MS溶液中，室溫下形成莖尖包埋丸，而后將包埋丸在0.25mol·L^-1、0.5mol·L^-1、0.75mol·L^-1、1mol·L^-1不同蔗糖梯度的固體培養基中各預培養1d。2.根據權利要求1所述的一種毛葡萄莖尖的包埋干燥超低溫保存方法，其特征在于：步驟（2）中恢復培養基為在MS培養基中每升添加1.5 mg的6-芐基嘌呤、0.02 mg的吲哚丁酸、20 g蔗糖和5 g瓊脂粉，pH5.8~6.0。3.根據權利要求1所述的一種毛葡萄莖尖的包埋干燥超低溫保存方法，其特征在于：步驟（2）中恢復培養過程中，先暗培養7 d，后轉移到光照條件下正常繼代培養，30d后檢測莖尖存活率和再生率，莖尖以轉變為綠色為存活、最終能生成小植株為再生標準。4.根據權利要求1所述的一種毛葡萄莖尖的包埋干燥超低溫保存方法，其特征在于：步驟（3）中生根培養基為：1/2MS培養基中每升添加0.15 mg吲哚丁酸、0.2 mg吲哚乙酸、20 g蔗糖和5 g瓊脂粉，pH5.8~6.0。5.根據權利要求1所述的一種毛葡萄莖尖的包埋干燥超低溫保存方法，其特征在于：步驟（2）（3）中培養溫度為25±1℃，光照強度為40umol·s^-1·m^-2，光照時間為12 h/d。6.根據權利要求1所述的一種毛葡萄莖尖的包埋干燥超低溫保存方法，其特征在于：步驟（4）中采用的1/8MS營養液中添加吲哚乙酸。