1.一種春蘭雜交和種子無菌播種育苗方法,通過以下步驟實現:
(1)獲得人工授粉的雜交種子:以具有性狀優勢互補的春蘭名品為親本,
開花2~20天內進行人工授粉,為防昆蟲,授粉前親本的唇瓣要去掉,授粉前
后要用透氣白色無紡布包蓋蕊柱或整朵花套授粉袋,若花期不遇,花粉塊在3~
5℃低溫、干燥條件下冷藏備用;
(2)無菌播種:待蒴果未完全成熟時采下,清洗果實表面,用10%的次
氯酸鈉浸泡10~20分鐘進行表面消毒,無菌水沖洗,用滴管吸取懸浮于無菌
水中的種子,均勻滴播于播種培養基上,播種培養基為:1/2MS+NAA4~5mg/l
+活性炭2g/l+蔗糖20g/l+瓊脂8~10g/l,pH5.4;
(3)根狀莖誘導芽:播種后在黑暗中培養,萌發后待根狀莖長至1.5~2cm
長時,接入誘導芽培養基,放在溫度20~25℃,在光照強度2500lux,光照12
小時/天的條件下培養2~3個月,在根狀莖的頂端和側面有芽點抽出,伸長,
當芽高4-5cm時轉至生根壯苗培養基,根狀莖誘導芽培養基為:
1/2MS+NAA0.2~0.5mg/l+BA1~2mg/l+蔗糖20g/l+瓊脂8~10g/l,pH5.4;
(4)生根壯苗培養:待芽高4-5cm時轉至生根壯苗培養基,放在溫度20~
25℃,光照強度2500lux,光照12小時/天的條件下培養2~3個月,在培養后
期的1~2個月,放在溫室內,靠自然光照培養,生根壯苗培養基:1/2MS+NAA
1~2mg/l+IBA0.2~0.5mg/l+BA0.5mg/l+活性炭2g/l+蔗糖20g/l+瓊脂8~
10g/l,pH5.4;
(5)試管苗移栽:當小苗長至高6-7cm,根數2~3條,葉片3~4片時,
即移栽,移栽介質為珍珠巖∶蛭石∶泥炭=2∶1∶1。
2.根據權利要求1中所述一種春蘭雜交和種子無菌播種育苗方法,其特
征在于,步驟(1)所述春蘭名品是指在瓣型、花色、花大或彩葉上有優勢的
品種。
3.根據權利要求1中所述一種春蘭雜交和種子無菌播種育苗方法,其特
征在于,步驟(1)中,若親本花期不遇,將父本的花粉塊取下放于小的自封
口塑料袋、小注射藥瓶或塑料指形管中蓋好,再放到有干燥劑硅膠鋪墊的塑料
飯盒中,在干燥、3~5℃低溫的冰箱中冷藏備用,當母本開花時,將保存的父
本花粉塊取出,放在白紙上,在20~25℃溫度和70~80%濕度的自然環境下
放置30~40分鐘,再進行授粉。
4.根據權利要求1中所述一種春蘭雜交和種子無菌播種育苗方法,其特
征在于,步驟(2)所述的蒴果未完全成熟,是指蒴果膨大、表面呈黃綠色、
達到八成熟未開裂。
5.根據權利要求1中所述一種春蘭雜交和種子無菌播種育苗方法,其特
征在于,步驟(3)所述根狀莖可以直接誘導芽,也可以保持在繼代增殖狀態。
6.根據權利要求1中所述一種春蘭雜交和種子無菌播種育苗方法,其特
征在于,步驟(3)中為了得到一定數量的同一株系,根狀莖可以分割,進行
不斷的繼代增殖培養,培養溫度20~25℃,單支日光燈的光照條件下培養,光
照強度800~1000lux,根狀莖繼代增殖培養基為:1/2MS+NAA3~4mg/l+
BA0.1~0.2mg/l+蛋白胨2~3g/l+活性炭2g/l+蔗糖20g/l+瓊脂8~10g/l,pH5.4。
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