本發明百合未受精子房離體培養的方法，屬于植物單倍體培養技術領域。本發明方法采用以開花前1天的花蕾為試材，滅菌后取其子房，將其橫切成片，之后將子房切片接種在BDS誘導培養基上，誘導胚胎發生，獲得了較高頻率的成胚率，平均每個子房含有108～223個胚性胚珠。之后再將誘導的子房切片轉接在BDS再生培養基上通過胚胎發生途徑得到單倍體、二倍體、非整倍體等其它倍性的再生植株。本發明方法對加快百合育種、種質創新和遺傳學基礎研究具有重要意義。

1.百合未受精子房離體培養的方法，包括如下步驟：
(1)選取合適的花蕾，滅菌；
(2)取出子房，將其橫切成片；
(3)將子房切片接種在含有誘導培養基的三角瓶或培養皿中培養20～25d，誘導胚珠內胚胎
形成；
(4)將含有誘導膨大胚珠的子房片轉接在植株再生培養基中，誘導胚胎萌發進行植株再生；
(5)將再生植株轉接到生根培養中進行生根15～20d，獲得根系健壯的無菌組培苗；
所述的合適花蕾為開花前1天的花蕾，
所述誘導培養基：BDS+2,4-D2mg/L+6-BA2mg/L+蔗糖100g.L^-1+瓊脂6g.L^-1，pH6.0；
植株再生培養基為BDS+蔗糖50g.L^-1+瓊脂6g.L^-1，pH6.0；生根培養基為1/2MS++IBA0.1
mg.L^-1+NAA0.1mg.L^-1+蔗糖60g.L^-1+瓊脂6g.L^-1，pH6.0；
所述步驟(4)的再生培養時間為80～100d，
所述誘導、生根的培養條件為：光照1600lx、14h白天/10h黑夜，24℃-26℃條件下進
行培養。
2.根據權利要求1所述的方法，所述切片厚度為1～2mm。
3.根據權利要求1所述的方法，所述滅菌采取如下順序步驟：將百合花蕾，置于無菌瓶中，
先用75％的酒精表面滅菌30s，之后用10％NaClO消毒10min，然后無菌水沖洗3次，每次
3分鐘。
4.根據權利要求1所述的方法，所述方法還包括再生植株的倍性鑒定步驟。
5.根據權利要求4所述的方法，所述倍性鑒定方法采用根尖染色體計數法：切取3～8mm根
尖置于0.7mmol^-1放線菌酮中25℃預處理8～9h，然后放入卡諾氏固定液中固定24h，用蒸餾
水洗凈后，用1mol·L^-1HCl在60℃水浴條件下解離10min，蒸餾水漂洗2-3次，然后用卡寶
品紅染色制作壓片，于顯微鏡下進行染色體觀察，選取分散良好的中期分裂細胞進行顯微拍
照，每份材料觀察30個處于有絲分裂中期的細胞，統計染色體數目，確定染色體倍性水平。
6.根據權利要求5所述的方法，所述顯微鏡的型號為OlympusCX31。