本發(fā)明公開了一種提高真菌產(chǎn)巴卡亭III產(chǎn)率的氧化環(huán)境發(fā)酵方法，其包括在液體培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)巴卡廷III的紅豆杉內(nèi)生菌Diaporthe phaseolorum的菌株no.79，當(dāng)真菌在培養(yǎng)基中培養(yǎng)2天(48小時)后，第一次加入30ml的雙氧水，然后每隔3天分別加入60ml的雙氧水，直至第21天發(fā)酵結(jié)束，通過該氧化培養(yǎng)環(huán)境，以使在所述菌株處于氧化脅迫環(huán)境中，同時為真菌生長提供叫足夠的氧氣，最終提高所培養(yǎng)內(nèi)生真菌的巴卡廷III產(chǎn)生量。本發(fā)明相比較傳統(tǒng)發(fā)酵培養(yǎng)方法，顯著的提高了菌株no.79的產(chǎn)率，方法簡單且經(jīng)濟(jì)，適宜于工業(yè)化生產(chǎn)，巴卡廷III產(chǎn)率可提高1.8倍。

1.一種提高真菌產(chǎn)巴卡亭III產(chǎn)率的氧化環(huán)境發(fā)酵方法，其特征在于，包括以下步驟：在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)產(chǎn)巴卡廷III的紅豆杉內(nèi)生菌，Diaporthe phaseolorum的菌株no.79，當(dāng)真菌在培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，第一次加入雙氧水，然后每隔3天添加一次雙氧水，直至發(fā)酵結(jié)束，得到真菌培養(yǎng)液，并對真菌培養(yǎng)液進(jìn)行回收和提純；所述培養(yǎng)基為PDB培養(yǎng)基，其組成為:水1000ml、馬鈴薯600g、蔗糖280g、pH6.5-7.0；所述培養(yǎng)一段時間的具體時間長度是2天；所述第一次加入雙氧水的量為每1000ml培養(yǎng)基中加入30ml雙氧水；所述每隔三天加入雙氧水的量為每1000ml培養(yǎng)基中加入60ml雙氧水；所述的回收并提純的步驟包括：1)真菌培養(yǎng)液用濾紙過濾備用，菌絲體殘渣加入石英砂被充分研磨，研磨的后的殘渣在45℃條件下被充分干燥，然后稱重備用；2)將干燥稱重后的菌絲體粉末放入30ml體積比為1:1的氯仿/甲醇混合液，充分混勻為懸濁液，然后在超聲波震蕩30分鐘，過濾，將濾渣采用上述方法提取；3)合并兩次所得濾液并在40℃條件下低壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，然后將所的到的膏狀蒸發(fā)殘留物溶解在30ml氯仿中，然后用30ml的水再次抽提；4)收集有機(jī)相，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，所得干燥殘留物被溶解在5ml的甲醇中，并用0.45lm孔過濾器過濾備用；5)過濾后的真菌培養(yǎng)液在70℃條件下低真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)；6)當(dāng)液體剩余10ml時，加入30ml體積比為1:1的氯仿/甲醇混合液，然后使用和菌絲體相同的方法進(jìn)行巴卡廷III的分離。