一種朝鮮薊品種LORCA（勞卡）二步生根方法，包括如下步驟：（1）生根培養(yǎng)基配制、（2）組培苗培養(yǎng)條件、（3）生根培養(yǎng)、（4）煉苗、（5）移栽。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：本發(fā)明采用二步生根法對(duì)朝鮮薊組培苗生根，使根系的誘導(dǎo)和生長(zhǎng)分開(kāi)，而每一步使用的培養(yǎng)基配方，都是朝鮮薊組培上的首創(chuàng)。通過(guò)采用白色牛皮紙，大大降低瓶?jī)?nèi)的濕度，玻璃化現(xiàn)象有效遏制。這種羊皮紙透氣很好，大多用于水稻、油菜等作物的套袋育種中，而且該紙可有效阻止外界的霉菌等進(jìn)入，不會(huì)對(duì)瓶苗造成污染。增加瓊脂粉用量以及遮光處理，這對(duì)降低玻璃化和增加生根率都非常有效。生根率提高，從20%提高到86%。瓶苗馴化成活率提高，從65%提高到92%。

1.一種朝鮮薊品種LORCA（勞卡）二步生根方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1） 生根培養(yǎng)基配制
（1.1）母液配制及保存
選用化學(xué)純或分析純的化學(xué)藥品，根據(jù)MS培養(yǎng)基配方，大量元素配成20倍，其中C_aCl₂單
獨(dú)配成40倍；微量元素配成100倍；鐵鹽配成100倍；有機(jī)物配成100倍，其中肌醇單獨(dú)配成
100倍；L-酪氨酸配成20倍，NAA配成0.1mg·mL^-1，6-BA配成0.1mg·mL^-1將所有母液保存在4
℃的冰箱里；
（1.2）培養(yǎng)基配制
第一步生根培養(yǎng)基：1/2MS+NAA1.0mg·L^-1+6-BA0.6mg·L^-1+ L-酪氨酸50mg·L^-1+活性
炭2.0g·L^-1+肌醇50mg·L^-1，瓊脂粉7 g·L^-1，白糖20 g·L^-1，pH 5.5；
第二步生根培養(yǎng)基：MS+肌醇50mg·L^-1，瓊脂7 g·L^-1，白糖40 g·L^-1，pH 5.5；
瓊脂粉采用凝膠強(qiáng)度>1300g/cm²的瓊脂粉，每升用量5克；
培養(yǎng)基采用240ml玻璃培養(yǎng)瓶分裝，不使用普通的透氣瓶蓋，采用14×14cm的白色牛皮
紙，再使用白色棉繩扎緊瓶口；
（1.3） 培養(yǎng)基滅菌
瓶裝培養(yǎng)基在10h內(nèi)完成滅菌，滅菌方式采用高壓蒸汽滅菌，在壓力0.105MPa、溫度121
℃條件下滅菌20min～30min；鍋內(nèi)的滅菌物不超過(guò)鍋的容量3/4，高壓滅菌時(shí)鍋內(nèi)使用蒸餾
水；
（1.4） 培養(yǎng)基保存
滅菌后的培養(yǎng)基放入接種室，常溫條件下7d內(nèi)使用，2℃～4℃條件下14d內(nèi)使用；培養(yǎng)
基應(yīng)保存于潔凈環(huán)境中，注意避光和防塵；
（2） 組培苗培養(yǎng)條件
培養(yǎng)室的溫度控制在25℃±3℃，相對(duì)空氣濕度控制在70%～80%，光照強(qiáng)度為27μmol?
m-2?s-1～36μmol?m^-2?s^-1，光照時(shí)間為12h/d；
（3）生根培養(yǎng)
（3.1） 第一步生根培養(yǎng)
將誘導(dǎo)出的朝鮮薊叢生芽，高1.5厘米以上的芽切割下來(lái)，移入第一步生根培養(yǎng)基中；
移栽完畢后，放入組培培養(yǎng)架上，關(guān)掉培養(yǎng)架上的燈，并用報(bào)紙將瓶苗蓋上，遮光2天；
（3.2）第二生根培養(yǎng)
15-20天后，有一小部分瓶苗長(zhǎng)出白色的根；如果根系長(zhǎng)度不到0.5㎝，一律接種到第
二步生根培養(yǎng)基中；若根系長(zhǎng)度在0.5㎝以上或者根系的數(shù)量在3條以上，就留下來(lái)直接馴
化；
（4） 煉苗
（4.1） 煉苗標(biāo)準(zhǔn)
當(dāng)幼苗發(fā)育到2～3 片葉、3～5 條根，葉片1～2 cm 長(zhǎng)、根長(zhǎng)0.5～1cm時(shí)，即可進(jìn)行煉
苗處理；
（4.2） 組培苗馴化
將裝組培苗的培養(yǎng)瓶從培養(yǎng)架上取下，迅速轉(zhuǎn)移到日光溫室中，自然散射光下煉苗，溫
度控制在20℃～25℃，每天中午在培養(yǎng)瓶周?chē)鷩姙㈧F水，以保濕降溫，封口煉苗1d～2d；
（4.3） 開(kāi)瓶鍛煉
封口煉苗后打開(kāi)瓶口，向瓶?jī)?nèi)注入超過(guò)培養(yǎng)基表面0.5cm高的自來(lái)水，溫度控制在20℃
～25℃，2d～3d后即可移栽；
（5） 移栽
（5.1）基質(zhì)準(zhǔn)備
栽培基質(zhì)采用草炭土和珍珠巖，按5:2比例配制；新基質(zhì)不需要消毒，使用過(guò)的基質(zhì)用
使用2000倍高錳酸鉀溶液浸泡12h，使用128孔穴盤(pán)種植幼苗；
（5.2） 移栽種植
移栽前，用自來(lái)水把根系上的培養(yǎng)基沖洗干凈，用1000倍甲基托布津或多菌靈浸泡組
培苗根部，放置于通風(fēng)陰涼處晾干水分至根系發(fā)白變軟，再栽入已準(zhǔn)備好的基質(zhì)中；栽后將
基質(zhì)澆透水，隨即拱膜保濕，7～l0天后揭膜通風(fēng)煉苗；
（5.3） 病蟲(chóng)害管理
苗期病害為立枯病，防治方法：育苗前使用0.05%炭疽福美作藥土防治，或50%多菌靈、
70%甲基硫菌靈作藥土防治，每平方米用藥8～9克；幼苗發(fā)病前期噴藥防治，選用70%土菌消
（惡霉靈）可濕性粉1000倍液，或70%甲基硫菌靈可濕性粉劑800倍液，隔周?chē)娛?，共噴兩次?br/>蟲(chóng)害主要是螞蟻，防治方法：在育苗床周邊撒一圈百蟲(chóng)靈作為驅(qū)蟻藥；
（5.4） 大田移栽標(biāo)準(zhǔn)
當(dāng)苗高8～10cm，葉片3～4時(shí)，帶基質(zhì)移栽到大田。