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一種石斛蘭試管內雜交育種方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-15
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310285055.7 
  • 技術(專利)名稱 一種石斛蘭試管內雜交育種方法 
  • 項目單位 中國科學院華南植物園
  • 發明人 曾宋君,吳坤林,張建霞,鄭楓,段俊 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 孫穎實
  • 發布時間 2021-12-15  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種石斛蘭試管內雜交育種方法。本發明采用試管內雜交育種的方法能大大縮短果實的成熟期并在短時間內使雜交后代在試管內開花并進行花形花色觀察,培育出新品種,從而加快了石斛蘭的育種速度,在國際上屬于首次報道。同時由于試管內石斛能周年開花,能進行自然界花期不遇品種間的雜交。另外,本發明各階段使用的培養基,其利用“花寶”為主要成分的培養基成份獨特,不但成本低,而且開花率高,果實發育快。并且實施本發明只需有簡單的植物組織培養設備即可進行,因此整個育種方法簡便,成本低,為培育高品質的石斛蘭品種創造了條件。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種石斛蘭試管內雜交育種方法,其特征在于,包括以下步驟:
    材料:開花時選取生長健壯的不同品種的石斛蘭母株進行人工授粉,待果實基本成熟時,
    選擇果實中的種子用于無菌播種;
    a、無菌播種:先將果實消毒后,用無菌水沖洗若干遍,再切開果實,用接種針將黃白色
    粉末狀胚接種到種子萌發培養基上培養,培養條件為:培養溫度24~28℃,光照度
    1500~2000lx,光照12~16小時/天,種子萌發,形成原球莖,直至形成2~3厘米高的完整
    的小植株;
    b、試管開花誘導和試管內雜交育種:將2~3厘米高的完整的小植株轉到試管開花誘導培
    養基上,培養直至開花,培養條件為:培養溫度24~28℃,光照度1500~2000lx,光照12~16
    小時/天,選取試管內花色、花形正常的不同品種的石斛蘭花朵在無菌條件下進行相互間的
    人工授粉,授粉后將帶花植株轉移到生根壯苗培養基上培養,培養條件為:培養溫度24~28℃,
    光照度1500~2000lx,光照12~16小時/天,直至果實成熟,
    c、雜交組合的無菌播種和試管開花誘導:采取b步驟的試管內的成熟果實,切開,將胚
    在種子萌發培養基上播種培養,培養條件為:培養溫度24~28℃,光照度1500~2000lx,光
    照12~16小時/天,種子萌發形成原球莖,直至形成完整的小植株,再將小植株轉移到試管
    開花誘導培養基上進行開花誘導培養,培養條件為:培養溫度24~28℃,光照度1500~2000lx,
    光照12~16小時/天,試管內開花后,觀察雜交組合的花形和花色;
    d、新品種的組織培養:開花后選擇花形、花色優良的株系進行組織培養,操作時以優良
    株系的莖尖或莖節為外植體,在原球莖誘導和繼代增殖培養基上進行繼代增殖培養,培養條
    件為:培養溫度24~28℃,光照度1500~2000lx,光照12~16小時/天,形成類原球莖,
    將類原球莖轉移到生根壯苗培養基上進行生根壯苗培養,培養條件為:培養溫度24~28℃,
    光照度1500~2000lx,光照12~16小時/天,得到試管苗;
    e、試管苗移栽:當試管苗能長至3~4厘米高時,轉移到自然光下進行煉苗,再移栽到基
    質中培養,得到石斛蘭雜交種苗;
    所述的種子萌發培養基為每升含有:花寶1號2~3克、蛋白胨0.5~2克、椰子汁50~100
    亳升、蔗糖15~30克、含肌醇的MS培養基的維生素成分、活性炭0.5~1克,常量的瓊脂,
    余量為水,pH?5.2~5.4;
    所述的試管開花誘導培養基每升含有:花寶1號1~1.5克、花寶2號1~1.5克、水解酪
    蛋白0.1~0.3克、6-芐基嘌呤0.5~3.0毫克、萘乙酸0.1~0.5毫克、多效唑0.1~0.5毫克、蔗
    糖30~40克、含肌醇的MS培養基的維生素成分,常量的瓊脂,余量為水,pH?5.2~5.4;
    所述的生根壯苗培養基每升含有:花寶1號1~2克、花寶2號1~1.5克、蛋白胨0.5~2
    克、蔗糖15~30克、含肌醇的MS培養基的維生素成分、萘乙酸0.1~0.5毫克、香蕉汁50~100
    克、活性炭0.5~1克、常量的瓊脂,余量為水,pH?5.2~5.4;
    所述的原球莖誘導和繼代增殖培養基每升含有:花寶1號1~2克,花寶2號1~1.5克、
    蛋白胨0.5~2克、椰子汁50~100亳升、蔗糖20~30克、含肌醇的MS培養基的維生素成分、
    6-芐基嘌呤0.5~2.0毫克、常量的瓊脂,余量為水,pH?5.2~5.4。
    2.根據權利要求1所述的石斛蘭試管內雜交育種方法,其特征在于,所述的步驟a無菌播
    種:先將果實消毒后,用無菌水沖洗若干遍,其為先將果實用體積分數75%的酒精浸泡
    30秒后置于質量分數0.1%的升汞溶液中消毒20分鐘,無菌水漂洗4~5次。
    3.根據權利要求1所述的石斛蘭試管內雜交育種方法,其特征在于,所述的步驟d的類原
    球莖能再轉接到新的原球莖誘導和繼代增殖培養基上進行繼代增殖培養,培養條件為:
    培養溫度24~28℃,光照度1500~2000lx,光照12~16小時/天,形成類原球莖,類原
    球莖再轉移到生根壯苗培養基上進行生根壯苗培養。
    4.根據權利要求1所述的石斛蘭試管內雜交育種方法,其特征在于,所述的試管苗移栽是
    當試管苗能長至3~4厘米高時,每叢有2~3個芽時,轉移到自然光下煉苗10天,然后將
    其從玻璃瓶中取出,洗凈根部的培養基,用泥炭和蘭石按體積比1:1比例混合的混合基
    質中栽培,常規條件下培養,得到石斛蘭雜交種苗。
    展開

專利技術附圖

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