1.一種八角科植物“孩兒蓮”的組織培養繁殖方法,其特征在于,進行
離體組織培養,包括如下步驟:
1)以“孩兒蓮”當年生枝條頂端的萌動芽為起始材料,經洗滌液浸泡、
流水沖洗工序洗凈后,在室內晾干,用作組織培養繁殖的外植體;
2)將上述外植體在濃度為體積比70~75%的乙醇溶液中進行5~6秒鐘
的表面處理后,在濃度為重量體積比0.1%的HgCl2溶液中進行5~6分鐘的
殺菌處理,再用無菌水充分清洗5~6次,完成對外植體的消毒滅菌處理;
3)從上述消毒滅菌后的枝條上切取芽片,接種到初代培養基上,在每天
光照12~15小時,光照強度為1500~2000LX、溫度為23℃±1℃的條件下培
養,待新葉萌發后轉移到繼代培養基上繼續培養,得到發育正常的組培苗;
所述的初代培養基為White培養基+500mg.L-1抗褐化劑PVP+6-BA?2.0
mg.L-1+NAA?0.5mg.L-1,添加蔗糖和瓊脂粉,按重量體積比,蔗糖濃度為初
代培養基的3%,瓊脂粉濃度為初代培養基的0.6%;調節pH為5.6~5.8;
所述的繼代培養基為White培養基+500mg.L-1抗褐化劑PVP+6-BA?2.0
mg.L-1+NAA?0.1mg.L-1,添加蔗糖和瓊脂粉,按重量體積比,蔗糖濃度為初
代培養基的3%,瓊脂粉濃度為初代培養基的0.6%;調節pH為5.6~5.8。
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