本發明涉及華榛誘導叢生芽快繁方法。主要技術要點是以華榛實生苗莖段和成熟種胚為外植體，接種于啟動培養基MS+KT1.0mg·L+IBA0.05mg·L+GA1.0mg·L+瓊脂5.8g·L+蔗糖25g·L+AC0.1g·L和MS+GA3.0mg·L+瓊脂5.8g·L+蔗糖25g·L+AC0.1g·L配方上，定芽誘導率達到96.4％以上，再轉接叢生芽誘導MS+KT1.5mg·L+IBA0.05mg·L+GA1.0mg·L+胰蛋白胨0.1g·L+瓊脂5.8g·L+蔗糖25g·L+AC0.1g·L上，萌芽率為92％。

1.一種華榛誘導叢生芽快繁方法，其特征在于，包括如下步驟：
莖段快繁體系的建立
外植體選擇：分別采集3月、4月、5月華榛播種出苗后7-10d健壯實生小苗，去除根部，保
留子葉并摘去其上部2片葉，自來水清洗植株表面灰塵，洗衣粉浸泡8min后自來水沖洗1h，
放置超凈工作臺，用75%酒精浸泡30s，再用0.1%升汞消毒15min，無菌水清洗5-6遍，切成2cm
帶芽莖段，置于無菌濾紙上吸干表面水分備用；
莖段誘導萌發：將帶芽莖段接種于啟動培養基中，在溫度26±1℃、濕度80±5%、光照
14h/d、光照強度1800-2000lx下培養，一周后定芽開始萌動，培養三周后節間抽長，每株有
2-3片新葉展開，葉色呈翠綠色，所述的啟動培養基為MS+KT1.0mg·L^-1 +IBA0.05mg·L^-1 +
GA₃1.0mg·L^-1 +瓊脂5.8g·L^-1+蔗糖25g·L^-1+AC0.1g·L^-1；
種胚快繁體系的建立
外植體預處理：采集9-10月份華榛成熟種子，將進行實驗的華榛成熟種子提前7d處理，
鉗子去除外果皮、堅硬的內果皮，先進行80℃水中浸泡24h的熱處理，再進行0℃冷藏室5d冷
藏的冷處理，然后取出種子，放入GA₃5.0mg·L^-1浸泡1h；
外植體采集：將預處理后的華榛種子用洗衣粉浸泡6min，自來水沖洗1h，放置超凈工作
臺上；采用二次消毒法，先用75%酒精浸泡30s，0.1%升汞消毒8min，無菌水清洗5-6遍，再去
除內種皮，0.05%升汞消毒3min，無菌水清洗5-6遍，置于無菌濾紙上吸干材料表面水分備
用；
啟動培養：
在超凈工作臺上將消毒好華榛種子，將胚乳切去1/2，保留含胚芽部分，接種于啟動培
養基上，在暗培養15d后，再在溫度26±1℃、濕度80±5%、光照14h/d、光照強度1800-2000lx
下培養，7d后胚乳膨大、胚根長出、子葉展開，10-20d，形成單芽且有2-3片新葉展開，葉色呈
翠綠色，所述的啟動培養基為MS+GA₃ 3.0mg·L^-1+瓊脂5.8g·L^-1+蔗糖25g·L^-1+AC 0.1g·
L^-1；
叢生芽誘導：
將莖段和種胚誘導的單芽，切成3cm接至誘導培養基上，所述的誘導培養基為MS+
KT1.5mg·L^-1+IBA0.05mg·L^-1+GA₃1.0mg·L^-1+胰蛋白胨0.1g·L^-1+瓊脂5.8g·L^-1+蔗糖
25g·L^-1+AC0.1g·L^-1，通過10d培養，定芽基部產生愈傷組織，連續培養20d后由胚性愈傷
團逐步形成叢生芽，從而快速建立華榛誘導叢生芽快繁再生體系。