1.發酵制備選自L-甲硫氨酸、L-半胱氨酸、L-胱氨酸、L-高半胱氨酸
和L-高胱氨酸的含硫氨基酸的方法，包括步驟：
a)提供過表達編碼具有硫代硫酸硫轉移酶活性的多肽的基因的腸桿菌
科微生物或棒桿菌科微生物，所述多肽由SEQIDNO:2所示氨基酸序列組
成；
b)在含有無機硫源的培養基中發酵來自a)的微生物，獲得發酵液，所
述無機硫源來自硫代硫酸鹽或者硫代硫酸鹽和硫酸鹽的混合物；和
c)濃縮來自b)的發酵液中的含硫氨基酸。
2.根據權利要求1的方法，其中通過選自下組的一或多種措施增加編
碼具有硫代硫酸硫轉移酶活性的多肽的基因的表達：
a)所述基因的表達在啟動子的控制下，所述啟動子在用于所述方法的
微生物中導致與起始菌株相比增加的表達；
b)與起始菌株相比增加編碼具有硫代硫酸硫轉移酶活性的多肽的基因
的拷貝數，通過將所述基因以多個拷貝插入質粒中或者通過將所述基因以
多個拷貝整合進微生物染色體中而進行；
c)通過使用核糖體結合位點實現所述基因的表達，所述核糖體結合位
點導致與起始菌株相比在用于所述方法的微生物中的翻譯增加；
d)通過針對用于所述方法的微生物優化密碼子使用而增加所述基因的
表達；
e)通過降低由所述基因轉錄的mRNA中的mRNA二級結構而增加所
述基因的表達；
f)通過消除由所述基因轉錄的mRNA中的RNA聚合酶終止子而增加
所述基因的表達；
g)通過使用由所述基因轉錄的mRNA中的mRNA穩定化序列而實現
所述基因的表達。
3.根據權利要求1的方法，其中所述硫代硫酸鹽是選自堿金屬鹽、堿
土金屬鹽、銨鹽及其混合物的鹽。
4.根據權利要求1的方法，其中所述硫酸鹽是選自堿金屬鹽、堿土金
屬鹽、銨鹽及其混合物的鹽。
5.根據權利要求1的方法，其中在發酵期間將硫代硫酸鹽的含量基于
在培養基中和發酵液中無機硫的總含量保持在至少5mol％。
6.根據權利要求1的方法，其中所述含硫氨基酸是L-甲硫氨酸。
7.根據權利要求1的方法，其中所述微生物是埃希氏菌屬。
8.根據權利要求7的方法，其中所述微生物物種是大腸桿菌(Escherichia
coli)。
9.根據權利要求1的方法，其中所述微生物是棒桿菌屬。
10.根據權利要求9的方法，其中所述微生物物種是谷氨酸棒桿菌
(Corynebacteriumglutamicum)。
11.根據權利要求10的方法，其中所述微生物選自與起始菌株相比具
有增加的天冬氨酸激酶活性和/或表達且調節蛋白McbR被弱化或缺失的谷
氨酸棒桿菌。
12.根據權利要求8的方法，其中所述微生物選自與起始菌株相比具
有增加的天冬氨酸激酶活性和/或表達且調節蛋白MetJ被弱化或缺失的大
腸桿菌。
13.微生物，選自
-與起始菌株相比具有增加的天冬氨酸激酶活性和/或表達且調節蛋白
McbR被弱化或缺失的谷氨酸棒桿菌；
-與起始菌株相比具有增加的天冬氨酸激酶活性和/或表達且調節蛋白
MetJ被弱化或缺失的大腸桿菌；
其中所述微生物分泌或產生L-甲硫氨酸，其中所述微生物過表達編碼
具有硫代硫酸硫轉移酶活性的多肽的基因，所述多肽由SEQIDNO:2所示
氨基酸序列組成。
14.根據權利要求13的微生物，其中所述起始菌株衍生自選自如下組
的微生物，所述的組由大腸桿菌MG1655、大腸桿菌W3110、大腸桿菌
DH5α、大腸桿菌DH10B、大腸桿菌BW2952、大腸桿菌REL606、谷氨酸
棒桿菌ATCC13032、谷氨酸棒桿菌R、谷氨酸棒桿菌DSM20411(先前名稱
黃色短桿菌(Brevibacteriumflavum))、谷氨酸棒桿菌DSM20412(先前名稱乳
發酵短桿菌(Brevibacteriumlactofermentum))、谷氨酸棒桿菌DSM1412(先前
名稱乳發酵短桿菌)、CorynebacteriumefficiensYS-314T(DSM44549)、谷氨
酸棒桿菌ATCC21608、谷氨酸棒桿菌DSM17322組成。
展開
