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一種柑橘脫毒及微芽嫁接的快速繁殖方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-09-25
  • 技術(shù)成熟度:正在研發(fā)
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201810843609.3 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種柑橘脫毒及微芽嫁接的快速繁殖方法 
  • 項(xiàng)目單位 中國科學(xué)院華南植物園
  • 發(fā)明人 陳國華,陳冬怡,胡群英,黃春華,黃芳,葉秀粦 
  • 行業(yè)類別 其他領(lǐng)域
  • 技術(shù)成熟度 正在研發(fā)
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 周樹軍
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-09-25  
  • 01

    項(xiàng)目簡介

    本發(fā)明公開了一種柑橘脫毒及微芽嫁接的快速繁殖方法。本發(fā)明從外植體的誘導(dǎo)、砧木的無菌播種到獲得嫁接苗整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程,創(chuàng)新性的利用誘導(dǎo)出的柑橘不定芽作為接穗,在砧木的無菌苗上進(jìn)行嫁接,從而獲得嫁接苗,經(jīng)移栽后,其成活率高達(dá)93%以上,從而能夠獲得大量的無毒柑橘嫁接苗,使柑橘產(chǎn)業(yè)能夠可持續(xù)健康發(fā)展。本發(fā)明方法操作簡單,易于實(shí)施,所用的培養(yǎng)基和試劑易配置,成本低,易大范圍推廣。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種柑橘脫毒及微芽嫁接的快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步驟:S1、柑橘不定芽的誘導(dǎo):選取柑橘的幼嫩枝條作為外植體,將外植體進(jìn)行消毒處理后接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)條件為26~28℃,光照強(qiáng)度為50~80μmol m-2s-1,光照時(shí)間8~10h/d,直至誘導(dǎo)出不定芽;所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:每升培養(yǎng)基中含有6-芐氨基嘌呤2.0~3.0mg和/或6-糠基氨基嘌呤0.1mg,吲哚-3-丁酸0.1~0.2mg,其余成份為MT培養(yǎng)基,pH為5.9;S2、繼代增殖:將誘導(dǎo)出的不定芽轉(zhuǎn)到增殖培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng),培養(yǎng)條件為26~28℃,光照強(qiáng)度為60μmol m-2s-1,光照時(shí)間9h/d,繼代增殖得到的不定芽能用于柑橘的微芽嫁接或者繼續(xù)繼代增殖;增殖培養(yǎng)基為:每升培養(yǎng)基中含有6-芐氨基嘌呤3.0mg和吲哚-3-丁酸0.1mg,其余成份為MT培養(yǎng)基,pH為5.9;S3、砧木的無菌播種:將砧木種子進(jìn)行消毒處理后,接入萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)條件為26~28℃,光照強(qiáng)度為50~60μmol m-2s-1,光照時(shí)間9h/d,獲得砧木無菌苗;萌發(fā)培養(yǎng)基為:每升培養(yǎng)基中含有吲哚-3-丁酸1.0~3.0mg和α-萘乙酸0.1mg,其余成份為MT培養(yǎng)基,pH為5.9;S4、柑橘的微芽嫁接:以步驟S2誘導(dǎo)出的不定芽作為接穗,在砧木無菌苗上進(jìn)行嫁接后轉(zhuǎn)入穩(wěn)定培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)條件為26~28℃,光照強(qiáng)度為50~80μmol m-2s-1,光照時(shí)間8~10h/d,獲得試管苗;穩(wěn)定培養(yǎng)基為:每升培養(yǎng)基中含有α-萘乙酸0.1~0.2mg,吲哚-3-丁酸2.0~3.0mg和赤霉素0.1~0.2mg,其余成份為MT培養(yǎng)基,pH為5.9;S5、試管苗移栽:將試管苗移植到栽培基質(zhì)中,置于濕潤、遮蔭的環(huán)境下培養(yǎng),澆水,施肥以滿足試管苗生長所需的水分和營養(yǎng)需要,經(jīng)常規(guī)培養(yǎng),獲得栽培苗;所述的栽培基質(zhì)為泥炭土、椰糠、珍珠巖和河沙按體積比為3:2:2:1混合的混合基質(zhì);或者為珍珠巖;或者為椰糠、珍珠巖和河沙按體積比為2:2:1混合的混合基質(zhì);或者為泥炭土和珍珠巖按體積比為1:3混合的混合基質(zhì)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的柑橘脫毒及微芽嫁接的快速繁殖方法,其特征在于,所述的選取柑橘的幼嫩枝條作為外植體,將外植體進(jìn)行消毒處理后接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)具體為:選取柑橘的幼嫩枝條作為外植體,將枝條下段含腋芽部分用自來水清洗干凈后,先以體積分?jǐn)?shù)為75%酒精水溶液表面擦洗消毒10s,無菌水洗滌2次,之后在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%升汞水溶液中浸泡8min,并以無菌水洗滌3次,最后將莖段切成1cm大小,接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的柑橘脫毒及微芽嫁接的快速繁殖方法,其特征在于,所述的選取柑橘的幼嫩枝條作為外植體,將外植體進(jìn)行消毒處理后接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)具體為:選取柑橘的幼嫩枝條作為外植體,將枝條下段含腋芽部分用自來水清洗干凈后,先以體積分?jǐn)?shù)為75%酒精水溶液表面擦洗消毒10s,無菌水洗滌2次,之后在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%升汞水溶液中浸泡8min,并以無菌水洗滌3次,然后將其置于冰箱48h后再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%升汞水溶液浸泡2min,無菌水沖洗3次,最后將莖段切成1cm大小,接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的柑橘脫毒及微芽嫁接的快速繁殖方法,其特征在于,所述的將砧木種子進(jìn)行消毒處理是將砧木種子用自來水清洗干凈后,先以體積分?jǐn)?shù)為75%酒精水溶液表面擦洗消毒10s,無菌水洗滌2次,之后在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%升汞水溶液中浸泡8min,并以無菌水洗滌3次。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的柑橘脫毒及微芽嫁接的快速繁殖方法,其特征在于,所述的以步驟S2誘導(dǎo)出的不定芽作為接穗,在砧木無菌苗上進(jìn)行嫁接后轉(zhuǎn)入穩(wěn)定培養(yǎng)基中培養(yǎng)具體為:以步驟S2誘導(dǎo)出的不定芽作為接穗,在培養(yǎng)得到的砧木無菌苗的三分之一處切除頂端部分,然后在莖段縱切,切面保持光潔,在帶有葉原基的接穗上切取0.7mm微芽植入砧木切口處,使微芽與砧木切口緊密結(jié)合,然后轉(zhuǎn)入穩(wěn)定培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
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專利技術(shù)附圖

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