本發(fā)明公開了一種提高纖維素酶生產(chǎn)水平的發(fā)酵工藝，其特征在于，包括獲取菌種以及將獲取的菌種接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵獲得纖維素酶，在纖維素酶發(fā)酵過程中，根據(jù)菌體快速生長期和菌體穩(wěn)定期生長狀況的不同對發(fā)酵條件按照發(fā)酵時間進行分段調整。本發(fā)明工藝打破了傳統(tǒng)發(fā)酵方法的比較粗放的方法，提出了分段控制發(fā)酵過程參數(shù)，建立了細致的補料工藝。有效的為產(chǎn)酶提供良好的條件，很大提高了纖維素酶的生產(chǎn)水平，節(jié)省成本，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

1.一種提高纖維素酶生產(chǎn)水平的發(fā)酵工藝，其特征在于，包括獲取菌種
以及將獲取的菌種接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵獲得纖維素酶，在纖維素酶
發(fā)酵過程中，在發(fā)酵開始后的前36～48h為菌種的菌體快速生長期，在開始
發(fā)酵后的36～48h直至發(fā)酵結束為菌種的菌體穩(wěn)定期，根據(jù)菌體快速生長期
和菌體穩(wěn)定期生長狀況的不同對發(fā)酵條件按照發(fā)酵時間進行分段調整：
在發(fā)酵開始后的前36～48h內(nèi)發(fā)酵體系溫度為27～29℃，之后發(fā)酵體系
溫度調低為25～27℃，直至發(fā)酵結束；
在發(fā)酵開始后的前24～36h內(nèi)發(fā)酵體系中溶氧為40～70％，之后發(fā)酵體系
中溶氧調低為20％～50％，直至發(fā)酵結束；
在發(fā)酵開始后的第18～48h和在發(fā)酵開始后的第72～132h兩個時間段內(nèi)
向所述發(fā)酵體系內(nèi)緩慢添加葡萄糖溶液，所述葡萄糖溶液添加流速為8～16
mL/min，所述葡萄糖溶液的濃度為200～400g/L；
在纖維素酶發(fā)酵過程中的35～45h內(nèi)發(fā)酵體系pH值調高為4.8～5.2，之
后發(fā)酵體系pH在35～45h到55～65h調低為4.3～4.7，之后，在纖維素酶發(fā)酵
過程的第55～65h直至發(fā)酵結束再將發(fā)酵體系的pH調高為4.8～5.2；
在纖維素酶發(fā)酵開始后24～132h內(nèi)每隔6-12h添加纖維素一次，纖維素
添加方法為：
(1)將纖維素與水混合成濃度為150～300g/L的纖維素和水的混合液；
(2)按所述混合液與發(fā)酵體系的體積比為1∶15～1∶50向所述發(fā)酵體系中添
加所述混合液；
所述菌種為里氏木霉CCIC13052。
2.如權利要求1所述的提高纖維素酶生產(chǎn)水平的發(fā)酵工藝，其特征在
于，包括：
(1)獲取菌種：將所述菌種接種到種子培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)得種子培養(yǎng)液；
(2)將菌種的所述種子培養(yǎng)液按照體積比為1∶25～3∶50的比例接種到發(fā)酵
罐的發(fā)酵培養(yǎng)基中制成發(fā)酵體系，以纖維素為底物開始纖維素酶發(fā)酵。
3.如權利要求2所述的提高纖維素酶生產(chǎn)水平的發(fā)酵工藝，其特征在
于，在發(fā)酵開始后的前36～48h內(nèi)發(fā)酵體系溫度為28℃，之后發(fā)酵體系溫度
調低為26℃，直至發(fā)酵結束。
4.如權利要求3所述的提高纖維素酶生產(chǎn)水平的發(fā)酵工藝，其特征在
于，在發(fā)酵開始后的前24～36h內(nèi)發(fā)酵體系中溶氧為50％，之后發(fā)酵體系中
溶氧調低為30％，直至發(fā)酵結束。
5.如權利要求1所述提高纖維素酶生產(chǎn)水平的發(fā)酵工藝，其特征在于，
在纖維素酶發(fā)酵過程中的35～45h內(nèi)發(fā)酵體系pH值為5.0，之后發(fā)酵體系pH
在35～45h到55～65h調低為4.5，之后，在纖維素酶發(fā)酵過程的第55～65h
直至發(fā)酵結束再將發(fā)酵體系的pH調高為5.0。
6.如權利要求1所述的提高纖維素酶生產(chǎn)水平的發(fā)酵工藝，其特征在
于，所述纖維素為微晶纖維素。
7.如權利要求1～6中任一項所述的提高纖維素酶生產(chǎn)水平的發(fā)酵工藝，
其特征在于，所述纖維素酶發(fā)酵開始后的90～100h之后，每隔10～14h抽樣
檢測所述發(fā)酵體系的濾紙酶活一次，直至兩次抽樣檢測所述發(fā)酵體系的濾紙
酶活不再增加時結束所述纖維素酶發(fā)酵過程。