本發明公布了一種副干酪乳桿菌等混合菌生產的發酵飼料及其制備和應用方法。由副干酪乳桿菌（CICC20296）、枯草芽孢桿菌(ACCC10619)、釀酒酵母(CICC32236)先液體單獨發酵培養，再將發酵液按體積比1:1:1混合，接種到固體培養基中混合均勻后，置于密封容器中厭氧發酵，10-37℃培養75~240小時，產品活菌數可達200-300×10cfu.g，產品無需干燥直接飼用。本發明提出的發酵飼料的制備方法減少了抗生素的使用，所得到的發酵飼料含有大量的菌體蛋白、豐富的氨基酸和維生素等營養物質，有利于促進腸道菌群平衡，提高禽畜機體免疫力，提高生產性能，降低飼養成本。

1.一種混合菌發酵飼料的制備方法，其特征是：由副干酪乳桿菌CICC20296、枯草芽孢
桿菌ACCC10619、釀酒酵母CICC32236分別液體發酵培養，發酵液按體積比1:1:1混合后
進行固體發酵培養而成；
具體包括以下步驟：
(1)液體發酵
將經過斜面活化的副干酪乳桿菌取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件為：
MRS培養基，35～37℃，pH自然，靜置培養18～22h；然后按3～7％接種量接種進行液體
發酵培養，發酵條件為：35～37℃，pH自然，裝液量50～70％，靜置培養36～60h；
將經過斜面活化的枯草芽孢桿菌取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件為：
LB培養基，28～32℃，pH6.8～7.2，搖床轉速180～220r/min，培養16～20h；然后按2～8
％接種量接種進行液體發酵培養，發酵條件為：28～32℃，pH6.8～7.2，裝液量10～30％，
搖床轉速180～220r/min，培養20～24h；
將經過斜面活化的釀酒酵母取一環斜面菌株接種到種子搖瓶培養，培養條件為：PDA
培養基，26～30℃，pH6.2～6.8，搖床轉速180～250rpm；培養16～20h；然后按4～8％接種量
接種進行液體發酵培養，發酵條件為：26～30℃，pH6.2～6.8，裝液量10～30％，搖床轉速
180～250rpm；培養26～34h；
(2)固體發酵
分別取步驟(1)得到的三種發酵液按體積比1:1:1混合，按質量百分比3-10％的接種量將
發酵液與培養基主料充分混合,含水量控制在35～55％范圍；培養基主料包括：畜禽全價料
或者飼料原料；
(3)將步驟(2)得到的混合物料置于密封容器中，在10～37℃發酵環境溫度下靜止發酵，
連續固態厭氧發酵75～240小時；產品活菌數達200～300×10⁸cfu.g^-1。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征是，飼料原料包括麥麩、玉米粉、豆餅粉中的一
種或幾種。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征是，固體發酵在密封的發酵罐、發酵池、塑料容
器或真空袋中完成。
4.一種發酵飼料，其特征是：由權利要求1-3任一項所述的方法制備而成的飼料。
5.權利要求4所述的發酵飼料的應用方法，其特征是：直接，或者添加到飼料中喂飼畜
禽。
6.根據權利要求5所述的發酵飼料的應用方法，其特征是：在飼料或者飼料原料中添加
質量濃度為5％-30％。