本發明公開了一種基于銪配合物的可見光可激發的比率熒光溫敏探針及其制備方法和應用，所述探針的結構通式如下所示。與現有技術相比，本發明具有以下優點：(1)所述探針隨著溫度的變化銥和銪的發射強度比率發生明顯變化，對溫度響應十分靈敏；(2)所述探針具有良好的可逆性；(3)所述探針具有良好的穩定性和水溶性；(4)所述探針具有良好的生物相容性，可用于水溶液、細胞或活體的溫度檢測，在生物溫度檢測、生物成像、生物標記領域具有重要意義。

1.一種基于銪配合物的可見光可激發的比率熒光溫敏探針，其特征在于，所述探針的
結構通式如下：

其中O^O配體的結構為：

所述探針由以上4種單體通過無規共聚獲得；a、b、c、d分別表示各物質的摩爾百分含
量，
a+b+c+d＝100％，且a、b、c、d均不為0。
2.根據權利要求1所述的一種基于銪配合物的可見光可激發的比率熒光溫敏探針，其
特征在于，所述a＜1％，b≥95％，c＜5％，d＜2％。
3.權利要求1所述的一種基于銪配合物的可見光可激發的比率熒光溫敏探針的制備方
法，其特征在于，包含以下步驟：
第1步、銪配合物的合成
(1)采用濃硫酸和濃硝酸二者的體積比為濃硫酸:濃硝酸＝9:5在160～170℃條件下硝
化1,10-鄰菲啰啉得到5-硝基-1,10菲啰啉；
(2)采用水合肼和催化劑還原5-硝基-1,10菲啰啉，再與丙烯酰氯在乙腈或其他有機溶
劑中酰胺化反應得到N^N配體；
(3)將O^O配體和EuCl₃·6H₂O置于甲醇或乙醇中，調節溶液pH至6～8，60℃條件下回流
反應，再加入步驟(2)獲得的N^N配體繼續反應，即可合成銪配合物，銪配合物的結構通式
為：

第2步、銥配合物的合成
(1)氮氣保護條件下，將2,4-二氟苯硼酸和2-溴吡啶加入甲苯、乙醇、飽和K₂CO₃溶液的
混合溶液中，80℃條件下避光密閉反應12h,其中甲苯、乙醇、飽和K₂CO₃溶液三者的體積比為
3:1:1，柱層析得主配體2-(2,4-二氟苯基)吡啶；
(2)氮氣保護條件下，將IrCl₃·3H₂O和2-(2,4-二氟苯基)吡啶加入乙二醇乙醚、水的混
合溶液中，110℃條件下密閉反應24h，其中乙二醇乙醚與水的體積比為3:1，得到銥二氯橋，
銥二氯橋的結構式為：

(3)氮氣保護條件下，將步驟(2)制備的銥二氯橋和3-羥基-2-吡啶羧酸加入乙二醇乙
醚中，110℃條件下密閉反應12h，柱層析得到銥配合物[Ir(dfpp)₂(hpa)]，銥配合物[Ir
(dfpp)₂(hpa)]的結構式為：

(4)將步驟(3)制備獲得的銥配合物[Ir(dfpp)₂(hpa)]和3-溴丙烯置于N,N-二甲基甲酰
胺或其他有機溶劑中，常溫條件反應,反應完成后，經萃取、薄層層析得到銥配合物[Ir
(dfpp)₂(apa)]，銥配合物[Ir(dfpp)₂(apa)]的結構式為:

第3步、聚合物的合成
在氮氣保護條件下，將N-異丙基丙烯酰胺、(3-丙烯酰胺丙基)三甲基氯化銨、銥配合
物、銪配合物在四氫呋喃或其他有機溶劑中由偶氮二異丁腈做引發劑，80℃條件下密閉反
應,反應完成后，在乙醚或其他有機溶劑中沉降得到聚合物。
4.根據權利要求3所述的一種基于銪配合物的可見光可激發的比率熒光溫敏探針的制
備方法，其特征在于，當N-異丙基丙烯酰胺、(3-丙烯酰胺丙基)三甲基氯化銨、銥配合物、銪
配合物投料摩爾百分數分別為94％，4.8％，0.8％，0.4％，偶氮二異丁腈為總物質的量的
2％時，所制得的探針性能較佳。
5.權利要求1所述的一種基于銪配合物的可見光可激發的比率熒光溫敏探針在對水溶
液、細胞及活體溫度檢測中的應用。
6.權利要求1所述的一種基于銪配合物的可見光可激發的比率熒光溫敏探針在細胞成
像、活體成像中的應用。
7.權利要求1所述的一種基于銪配合物的可見光可激發的比率熒光溫敏探針在生物標
記中的應用。
8.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述細胞及活體內溫度檢測采用比率法或
比色法。