本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種微小核糖核酸miR?34a偶聯(lián)探針及其制備方法，首先將3?3’二硫代二丙酸進(jìn)行溶解，并向其中加入二環(huán)己基碳二亞胺（DCC）及N?羥基琥珀酰亞胺（NHS），室溫反應(yīng)后進(jìn)行過(guò)濾，蒸干溶劑得到中間產(chǎn)物；得到的中間產(chǎn)物溶解在二甲基亞砜（DMSO）中，并向其中加入3’?氨基修飾miR?34a、3’?氨基修飾AS1411以及N,N'?異丙基乙胺（DIPEA）；充分混合反應(yīng)得到反應(yīng)物混合液，最后通過(guò)高效液相色譜分離得到miR?34a偶聯(lián)探針；本發(fā)明的技術(shù)方案能夠提供對(duì)細(xì)胞毒性影響小、靶向運(yùn)輸快速高效、釋放效率高且制備方便的微小核糖核酸miR?34a偶聯(lián)探針及其制備方法。

1.一種微小核糖核酸miR-34a偶聯(lián)探針，其特征在于，具體結(jié)構(gòu)如下： ；其中，位于結(jié)構(gòu)式左側(cè)的AS1411為核酸適配體且序列為5’- GGTGGTGGTGGTTGTGGTGGTGGTGGTTTTTTTTTT-3’，可靶向結(jié)合腫瘤細(xì)胞表面高表達(dá)的核仁素；位于結(jié)構(gòu)式右側(cè)的miR-34a為合成miRNA且序列為5’-UGGCAGUGU-CUUAGCUGGUUGU-3’/5’-CAAUCAGCAAGUAUACUGCCC-U-3’，可靶向腫瘤細(xì)胞內(nèi)多種致癌基因；位于結(jié)構(gòu)式中部的中間連接化學(xué)基團(tuán)為腫瘤細(xì)胞內(nèi)還原性微環(huán)境響應(yīng)的二硫鍵。2.如權(quán)利要求1所述的一種微小核糖核酸miR-34a偶聯(lián)探針制備方法，其特征在于，具體通過(guò)如下化學(xué)反應(yīng)及步驟制備得到： ；步驟S1：首先將3-3’二硫代二丙酸進(jìn)行溶解，并向其中加入二環(huán)己基碳二亞胺（DCC）及N-羥基琥珀酰亞胺（NHS），所添加的配比分別是溶解液的2.2倍當(dāng)量的二環(huán)己基碳二亞胺（DCC）及溶解液的2.2倍當(dāng)量的N-羥基琥珀酰亞胺（NHS），室溫反應(yīng)后進(jìn)行過(guò)濾，蒸干溶劑得到中間產(chǎn)物；步驟S2：將所述步驟S1得到的中間產(chǎn)物溶解在二甲基亞砜（DMSO）中，并向其中加入3’-氨基修飾miR-34a、3’-氨基修飾AS1411以及N,N'-異丙基乙胺（DIPEA），上述加入的各反應(yīng)物重量配比分別為所述中間產(chǎn)物溶解液1倍當(dāng)量的3’-氨基修飾miR-34a、1倍當(dāng)量的3’-氨基修飾AS1411以及3倍當(dāng)量的N,N'-二異丙基乙胺（DIPEA）；步驟S3：所述步驟S2充分混合反應(yīng)得到反應(yīng)物混合液，最后通過(guò)高效液相色譜分離得到miR-34a偶聯(lián)探針。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種微小核糖核酸miR-34a偶聯(lián)探針制備方法，其特征在于：所述步驟S1的3-3’二硫代二丙酸是采用二氯甲烷溶解劑進(jìn)行溶解處理。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種微小核糖核酸miR-34a偶聯(lián)探針制備方法，其特征在于：所述步驟S1的室溫反應(yīng)時(shí)間設(shè)定為不少于1小時(shí)。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種微小核糖核酸miR-34a偶聯(lián)探針制備方法，其特征在于：所述步驟S3中混合反應(yīng)的溫度采用的37℃。