表面修飾的碳納米點的制備方法和作為熒光探針檢測Cu及谷胱甘肽的應用，本發明涉及Cu和谷胱甘肽的檢測方法，本發明是要解決現有的檢測Cu熒光探針易受其它金屬離子干擾、制備成本高、制備步驟復雜的技術問題。本發明以三乙烯四胺修飾的碳納米點作為熒光探針檢測Cu和谷胱甘肽，熒光探針的制備方法是將檸檬酸和尿素在水溶液中微波加熱，獲得的碳納米點加入到含有三乙烯四胺的乙醇溶液回流，制得熒光探針。該制備方法簡單、反應條件溫和、成本低。檢測方法：熒光探針與Cu的相互作用，使TCDs熒光猝滅并形成TCDs?Cu復合物，TCDs?Cu復合物進一步與谷胱甘肽相互作用，并使TCDs的熒光恢復，從而實現對Cu及谷胱甘肽的檢測。該探針可檢測水溶液及生命體中的銅離子和谷胱甘肽。

1.表面修飾的碳納米點的制備方法，其特征在于該方法按以下步驟進行：
一、按碳納米點與三乙烯四胺的質量比為1:(0.1～10)將碳納米點與三乙烯四胺加入
到乙醇中混合均勻，得到混合物；
二、將混合物加熱回流反應5～48h，得到粗產物；
三、將粗產物旋轉蒸發除去乙醇，再用苯洗滌粗產物1～5次，離心分離后，用超純水溶
解固相物，得到溶液，再將溶液過濾；將濾液真空干燥，即得到表面修飾的碳納米點；
其中步驟一中所述的碳納米點是由尿素和檸檬酸按質量比1:(1～6)的比例混合，然后
通過微波加熱制備的一種富含碳的納米顆粒。
2.根據權利要求1所述的表面修飾的碳納米點的制備方法，其特征在于步驟一中碳納
米點與三乙烯四胺的質量比為1:1。
3.根據權利要求1所述的表面修飾的碳納米點的制備方法，其特征在于步驟二中加熱
回流反應時間為24h。
4.權利要求1制備的表面修飾的碳納米點的應用，其特征在于表面修飾的碳納米點作
為熒光探針檢測二價銅離子和谷胱甘肽；其中銅離子和谷胱甘肽為水溶液中的銅離子和谷
胱甘肽或生命體中的銅離子和谷胱甘肽。
5.根據權利要求4所述的表面修飾的碳納米點的應用，其特征在于定性檢測銅離子和
谷胱甘肽的方法按以下步驟進行：
(1)將表面修飾的碳納米點溶于超純水中，形成TCDs水溶液，并測定溶液的熒光光譜；
(2)將上述的TCDs水溶液與待測水溶液Ⅰ混合，測定其熒光光譜，如果熒光強度顯著減
弱，則可以判定待測水溶液Ⅰ含有銅離子，形成了TCDs-Cu²⁺復合物；否則待測水溶液Ⅰ沒有銅
離子；
(3)將TCDs-Cu²⁺復合物的溶液與待測水溶液Ⅱ混合，測定其熒光光譜，如果熒光強度得
以恢復，則可以判定待測水溶液Ⅱ含有谷胱甘肽，形成TCDs-Cu²⁺-GSH；否則待測水溶液Ⅱ中
沒有谷胱甘肽。
6.根據權利要求4所述的表面修飾的碳納米點的應用，其特征在于定量檢測水溶液中
銅離子和谷胱甘肽的方法為標準曲線法，具體如下：
(1)配制不同濃度的含Cu²⁺的標準系列樣品Ⅰ，分別加入表面修飾的碳納米點溶液，并調
節至pH值6.0～8.3之間，并測試溶液的熒光光譜，讀出最大熒光發射峰的熒光強度值，以銅
離子的濃度為橫坐標、以最大熒光發射峰的熒光強度值為縱坐標作圖，繪出標準曲線；
(2)用與標準樣品Ⅰ相同的方法，測試待測溶液中加入表面修飾的碳納米點溶液后的熒
光光譜，根據最大熒光發射峰的熒光強度值在標準曲線上讀出銅離子的濃度值；
(3)配制不同濃度的含谷胱甘肽的標準系列樣品Ⅱ，分別加入TCDs-Cu²⁺混合溶液，并調
節至pH值6.0～8.3之間，并測試溶液的熒光光譜，讀出最大熒光發射峰的熒光強度值，以谷
胱甘肽的濃度為橫坐標、以最大熒光發射峰的熒光強度值為縱坐標作圖，繪出標準曲線；
(4)用與標準樣品Ⅱ相同的方法，測試待測溶液中加入TCDs-Cu²⁺混合溶液后的熒光光
譜，根據最大熒光發射峰的熒光強度值在標準曲線上讀出谷胱甘肽的濃度值。
7.根據權利要求4所述的表面修飾的碳納米點的應用，其特征在于生命體中的銅離子
和谷胱甘肽的檢測方法，按以下步驟進行：
(1)將待測的生命體放置到含有表面修飾的碳納米點水溶液中培養1～6h，然后用熒光
顯微鏡檢測生命體的活細胞；
(2)再把用TCDs培養后的生命體放入待測溶液Ⅰ中培養1～6h后，用熒光顯微鏡檢測生
命體的活細胞；
(3)進一步把TCDs-Cu²⁺培養后生命體放入待測溶液Ⅱ中培養1～6h后，再用熒光顯微鏡
檢測生命體的活細胞；
(4)如果在步驟(2)出現熒光強度顯著減弱，則可以判定待測溶液Ⅰ含有銅離子；
(5)如果在步驟(3)出現熒光強度恢復，則可以判定待測水溶液Ⅱ中含有谷胱甘肽。