本發明公開了一種艾滋病治療藥物3TC和FTC耐藥突變位點的引物對和探針，包括檢測HIV-1病毒RNA的pol基因的第184位、151位和65位突變位點M184V、M184I、Q151M和K65R的ARMS引物和Taqman探針。本發明還提供了上述引物對和探針在檢測3TC和FTC主要耐藥突變位點M184V，M184I、Q151M和K65R中的應用。本發明試劑盒檢測靈敏度高、特異性好、檢測成本低，為臨床艾滋病患者治療提供了用藥指導，實現了艾滋病患者個體化治療，能夠提高藥物有效果性，延長艾滋病患者生存時間，具有廣泛應用前景和社會效益。

1.用于檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點的引物對和探針，其特征在于：包括檢測HIV-1病毒RNA的pol基因的第65位、70位和151位突變位點K65R、K70E和Q151M的ARMS引物對和Taqman探針；K65R的ARMS引物對的上游引物和下游引物分別為SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示的核苷酸序列，Taqman探針為SEQIDNo.3所示的核苷酸序列，分別用FAM和BHQ1標記5’端和3’端；K70E的ARMS引物對的上游引物和下游引物分別為SEQIDNo.4和SEQIDNo.2所示的核苷酸序列，Taqman探針為SEQIDNo.3所示的核苷酸序列，分別用HEX和BHQ1標記5’端和3’端；Q151M的ARMS引物對的上游引物和下游引物分別為SEQIDNo.5和SEQIDNo.6所示的核苷酸序列，Taqman探針為SEQIDNo.7所示的核苷酸序列，分別用ROX和BHQ1標記5’端和3’端。2.用于檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點的引物對和探針，其特征在于：包括檢測HIV-1病毒RNA的pol基因的第65位突變位點K65R的ARMS引物對和Taqman探針；K65R的ARMS引物對的上游引物和下游引物分別為SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；ARMS引物對的Taqman探針為SEQIDNo.3所示的核苷酸序列，分別用FAM和BHQ1標記5’端和3’端。3.用于檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點的引物對和探針，其特征在于：包括檢測HIV-1病毒RNA的pol基因的第70位突變位點K70E的ARMS引物對和Taqman探針；K70E的ARMS引物對的上游引物和下游引物分別為SEQIDNo.4和SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；ARMS引物對的Taqman探針為SEQIDNo.3所示的核苷酸序列，分別用HEX和BHQ1標記5’端和3’端。4.用于檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點的引物對和探針，其特征在于：包括檢測HIV-1病毒RNA的pol基因的第151位突變位點Q151M的ARMS引物對和Taqman探針；Q151M的ARMS引物對的上游引物和下游引物分別SEQIDNo.5和SEQIDNo.6所示的核苷酸序列；ARMS引物對的Taqman探針為SEQIDNo.7所示的核苷酸序列，分別用ROX和BHQ1標記5’端和3’端。5.權利要求1至4任一項所述的引物對和探針在檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點中的應用。6.用于檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點的試劑盒，其特征在于：包括權利要求1至4任一項所述的ARMS引物對和探針。7.根據權利要求5所述的用于檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點的試劑盒，其特征在于：還包括RT-PCR混合液、混合酶液、陽性對照品混合液、陰性對照品混合液；所述RT-PCR混合液包括RT-PCR緩沖液、dNTPs、MgCl₂、3對上下游引物及3條探針；所述混合酶液包括M-MLV逆轉錄酶和TaqDNA聚合酶。8.根據權利要求6所述的用于檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點的試劑盒，其特征在于，各組分含量分別為：RT-PCR混合液875uL；混合酶液125uL；陽性質控品45uL；陽性對照品混合液45uL；陰性對照品混合液45uL。9.根據權利要求7所述的用于檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點的試劑盒，其特征在于：所述RT-PCR混合液包括：RT-PCR緩沖液（20mMTris-Hcl,100mMNaCl，pH8.3）終濃度1×；dNTPs終濃度3mM；MgCl₂終濃度為1.6mM；各ARMS引物對的上、下游引物的終濃度均為200nM；各ARMS引物對的Taqman以及試劑盒質控品引物對的Taqman探針終濃度均為300nM；所述混合酶液包括：M-MLV逆轉錄酶終濃度2U/μL；TaqDNA聚合酶終濃度0.05U/μL；所述陽性對照品混合液中模板cDNA終濃度0.1～10ng/μL。10.權利要求6至9任一項所述的試劑盒在檢測艾滋病治療藥物DDI和TDF耐藥突變位點中的應用，其特征在于：包括以下步驟：（1）總RNA提取：提取待測樣本的RNA，提到模板RNA溶液；（2）反應組分配制：分別配制檢測混合物、陽性對照品混合物和陰性對照品混合物；其中，檢測混合物按PCR混合液17.5uL、混合酶液2.5uL、模板RNA溶液5uL配制一人份；陽性對照品混合物按PCR混合液17.5uL、混合酶液2.5uL、陽性對照品混合液5uL配制一人份；陰性對照品混合物按PCR混合液17.5uL、混合酶液2.5uL、陰性對照品混合液5uL配制一人份；（3）擴增：分別將檢測混合物、陽性質控品混合物、陽性對照品混合物和陰性對照品混合物放入熒光定量PCR儀擴增，按以下程度進行擴增：42℃，10min，1cycle；95℃，3min，1cycle；95℃，5S，55℃，40S，45cycles；（4）結果判定：根據熒光信號到達設定閾值所經歷的循環數Ct值判定結果：當陽性質控品和陽性對照品的Ct值小于等于35，或者檢測混合物為陽性時，試劑盒有效；當陽性質控品或陽性對照品的Ct值大于35，或者檢測混合物無Ct值時，試劑盒無效或需重復檢測。11.如權利要求10所述的應用，其特征在于：步驟（4）中，根據檢測混合物的Ct值定性判定，依據為：Ct＞40時，待測樣本中無HIV治療藥物DDI和TDFF耐藥突變；35≤Ct≤40時，待測樣本可疑，需重檢一次，重檢結果如Ct＞40或無擴增曲線，則為待測樣本中無HIV治療藥物DDI和TDFF耐藥突變，反之則為待測樣本中有HIV治療藥物DDI和TDFF耐藥突變；Ct﹤35時，待測樣本中有HIV治療藥物DDI和TDFF耐藥突變產生。