本發(fā)明涉一種分光光度法快速檢測大腸菌群的方法，利用大腸菌群在37℃可以發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣特性，以自制培養(yǎng)基為主，其中添加指示劑溴甲酚紫和TTC溶液，大腸菌群發(fā)酵培養(yǎng)后不僅能生產(chǎn)紅色沉淀，而且可使培養(yǎng)液發(fā)生了由紫色變?yōu)辄S色的顏色變化，利用該發(fā)酵液顏色的變化程度與溶液中所含大腸菌群數(shù)量成正相關(guān)的特性，可得出待檢樣品液中大腸菌群的含量。本發(fā)明方法相比于現(xiàn)行國標方法，在檢測時間上有了大幅縮減，在加樣后培養(yǎng)60min?400min即可檢測樣品中的大腸菌群數(shù)值，試用范圍較廣，滿足了眾多檢測領(lǐng)域要求檢測時間短的需求，在未來快速檢測領(lǐng)域會有較好的應用前景。

1.一種分光光度法快速檢測大腸菌群的方法，其特征在于：步驟如下：
⑴溶液配制：
乳糖發(fā)酵檢測培養(yǎng)液：50-90μL2％(質(zhì)量濃度)溴甲酚紫溶液、4g胰蛋白胨、0.5g乳糖、
0.5gD-甘露醇、0.75gNaCl、0.02g十二醇硫酸鈉、0.01g脫氧膽酸鈉、100mL蒸餾水，pH6.8-
7.2，115℃，15min滅菌后待用；
TTC溶液：TTC加入無菌水制成0.5-3％(質(zhì)量濃度)溶液，避光保存、待用；
⑵檢測過程：
①樣品勻液的制備：
無菌操作取待檢樣品，8000r/min～10000r/min均質(zhì)1min～2min，制成體積比為1:10的
樣品勻液，或質(zhì)量：體積(g：L)為1:10的樣品勻液；
②過濾：
用中速定量濾紙過濾樣品勻液，得濾液；按濾液：濃縮的待檢液的體積比為5-10：1的比
例用膜過濾器過濾濾液，得濃縮的待檢液；取濃縮的待檢液按體積比為1：5-10的比例加入
含有乳糖發(fā)酵檢測培養(yǎng)液中，同時，按濃縮的待檢液：TTC溶液的體積比mL：μL為1：30-80的
比例取TTC溶液到乳糖發(fā)酵檢測培養(yǎng)液中，置于37℃培養(yǎng)；
③標準曲線的繪制：
培養(yǎng)60-400min后，檢測培養(yǎng)基中有顏色變化并伴有紅色沉底物質(zhì)生產(chǎn)，取檢測管中的
培養(yǎng)液，經(jīng)離心處理發(fā)酵液，5000-7000r/min離心，離心2min-5min，取上清液置于石英比色
皿中用分光光度計進行檢測，測量360nm—500nm特殊納米處的吸光值，建立不同含量大腸
菌群混合培養(yǎng)液顏色和大腸菌群含量之間的對應線性關(guān)系，繪制標準曲線；
④待檢樣品的檢測：
檢測樣品時，按步驟①-③的方法進行處理和培養(yǎng)待檢樣品，培養(yǎng)液有變色和沉淀現(xiàn)
象，按前述步驟將培養(yǎng)液離心后，取上清液在360nm—500nm處測定吸光值，記錄數(shù)據(jù)，與③
中標準曲線進行比對，根據(jù)對比結(jié)果確定未知樣品中所含大腸菌群數(shù)，最終得出待檢樣品
中所含大腸菌群數(shù)值。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分光光度法快速檢測大腸菌群的方法，其特征在于：所述步驟
⑵③中標準曲線的回歸方程為：
lgY＝14.89X-1.33
R²＝0.991
公式中：Y：未知樣品中大腸菌群的預計含量
X:360nm—500nm處的OD值
R：相關(guān)系數(shù)。
3.如權(quán)利要求1或2所述的分光光度法快速檢測大腸菌群的方法在水質(zhì)監(jiān)測、生物、食
品、衛(wèi)生方面的大腸菌群的快速檢測方面中的應用。