本發明公開了一種用于豬抗病育種的遺傳分子標記方法和應用。本發明是用大白豬FUT2基因轉錄起始密碼子?84bp多態位點作為抗病育種的分子標記方法與應用。檢測該分子標記的方法包括待測樣品的豬基因組DNA的提取及FUT2基因轉錄起始密碼子上游序列的PCR擴增，轉錄起始密碼子上游序列的PCR擴增產物經SSCP分析，當待測豬個體基因型為TT型(出現3條帶中的第2和第3條帶)，則為抗病育種的有利個體。本發明為從遺傳素質上永久性地提高大白豬斷奶仔豬大腸桿菌抗性和部分經濟性狀提供了有效的分子標記。用該遺傳標記對大白豬種豬選育時進行標記輔助選擇，開展抗病育種，可以提高斷奶仔豬抗大腸桿菌侵染的能力，從根本上降低腹瀉病的發病率，同時可以提高種豬的初生仔豬數和斷奶仔豬數。

1.一種用于豬抗大腸桿菌病育種的遺傳分子標記方法，其特征在于，包括以下步驟：
1）提取待測樣本的耳組織DNA；
2）利用FUT2基因ATG起始密碼子上游-84 bp標記對豬核心群全面檢測基因型
以提取的DNA為模板進行PCR擴增，擴增片段包含ATG起始密碼子上游-84 bp處SNP位
點，擴增片段長度195 bp，上下游引物序列為：
上游引物為：5’-AGGGGAAACACACCCTCAAAA-3’
下游引物為：5’-GGGAGAACAGGGAGCGGTTA-3’；
3）擴增產物用SSCP方法進行分析：如說明書附圖 圖1標號1所示，出現3條帶的為CT型，
如圖1標號2、3所示，出現3條帶中間的第1和第3這2條帶的為CC型，如圖1標號4所示，出現3
條帶中間的第2和第3這2條帶的為TT型，選擇TT型的樣本為抗病育種中的有利個體。
2.根據權利要求1所述的遺傳分子標記方法，其特征在于，待測樣本選擇大白豬，每個
個體采取耳組織樣約1.0 g，放入1.5 mL的離心管內，置-20 ℃存放；采用常規酚-氯仿法提
取基因組DNA，超純水溶解后用NanoDrop-1000微量核酸測定儀測定其濃度和純度，根據其
濃度用超純水稀釋成100 mg/μL，-20 ℃保存備用。
3.根據權利要求1所述的遺傳分子標記方法，其特征在于，所述PCR擴增體系：基因組混
合DNA濃度為100 ng/μL，1.0 μL，PCR Master-Mix 10.0 μL，上下游引物F1/R1濃度為10
pmol/L各1.0 μL，加ddH₂O補足至20 μL；條件為：95℃預變性5 min，95℃變性30 s，63℃退
火30 s，72℃延伸50 s，35個循環，72℃延伸10 min，最后4℃保存備用。
4.權利要求1-3中任一所述的遺傳分子標記方法在豬抗大腸桿菌病育種過程中進行標
記輔助選擇的應用。