本發明公開了一株枯草芽孢桿菌AP139及其發酵菌劑和它們的應用方法，該枯草芽孢桿菌保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：M2014053。該菌株通過抗豬產毒巴氏桿菌篩選，能在培養皿實驗中抑制豬產毒巴氏桿菌的生長繁殖。將枯草芽孢桿菌AP139在動物養殖舍中進行噴霧，具有顯著的抑制空氣中巴氏桿菌的生長特性，減少了養殖場巴氏桿菌發病率，同時也對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌有很好的抑制效果，具有良好的應用前景。

1.一株保藏編號為CCTCC NO：M 2014053的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)AP139。
2.權利要求1所述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑，其特征在于，是由以下方法制備
而成的：
第一步：所述的枯草芽孢桿菌AP139在LB固體培養基上進行劃線培養，培養溫度30-37
℃，培養時間18-36h；
第二步：從第一步的LB固體培養基上挑取枯草芽孢桿菌AP139單個克隆株至裝有20-
40％容積LB液體培養基的10ml EP管中，培養溫度為30-37℃，轉速為150-225r/min，培養時
間18-36h；然后用LB液體培養基調整細菌濃度為1×10⁹-10¹⁰CFU/ml，取3-5ml接種于
100mlLB液體培養基中，在搖床中進行培養，培養溫度30-37℃，轉速150-225r/min，培養時
間18-36h；
第三步：取第二步所得到的枯草芽孢桿菌AP139液體搖瓶培養液，按照3-5％體積接種
量，接種到10L發酵罐中，發酵條件為：裝液量4-7L的LB液體培養基，發酵溫度25-40℃，pH值
6.8-7.8，發酵時間18-36h，轉速，200-400r/min。
3.權利要求1所述的枯草芽孢桿菌AP139的應用方法，其特征在于：所述的枯草芽孢桿
菌AP139用于制備抑制巴氏桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌中的一種或幾種的
制劑。
4.根據權利要求3所述的枯草芽孢桿菌AP139的應用方法，其特征在于：所述的枯草芽
孢桿菌AP139用于制備抑制巴氏桿菌的制劑。
5.根據權利要求3或4所述的枯草芽孢桿菌AP139的應用方法，其特征在于：所述的枯草
芽孢桿菌AP139用于制備養殖舍消毒的制劑。
6.根據權利要求3或4所述的枯草芽孢桿菌AP139的應用方法，其特征在于：所述的枯草
芽孢桿菌AP139用于制備動物飼料的添加劑。
7.權利要求2所述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑的應用方法，其特征在于：所述的
枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑用于制備抑制巴氏桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門
氏菌中的一種或幾種的制劑。
8.根據權利要求7所述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑的應用方法，其特征在于：所
述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑用于制備抑制巴氏桿菌的制劑。
9.根據權利要求7所述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑的應用方法，其特征在于：所
述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑用于制備養殖舍消毒的制劑。
10.根據權利要求7所述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑的應用方法，其特征在于：所
述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑用于制備動物飼料的添加劑。
11.根據權利要求9或10所述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑的應用方法，其特征在
于：將枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑先制備成1×10⁸-1×10⁹CFU/mL的溶液，LB液體培養基
500-3000倍稀釋后在養殖舍中進行噴霧，使得噴霧后養殖舍枯草芽孢桿菌AP139的濃度為1
×10⁵-1×10⁶CFU/m³。
12.根據權利要求11所述的枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑的應用方法，其特征在于：
將枯草芽孢桿菌AP139的發酵菌劑先制備成1×10⁸CFU/mL的溶液，LB液體培養基1000倍稀
釋后在養殖舍中進行噴霧，使得噴霧后養殖舍枯草芽孢桿菌AP139的濃度為3×10⁵CFU/m³。