本發明提供一種可以誘導腫瘤免疫反應的海藻酸鹽微顆粒的制備方法，利用基因工程技術，構建MIP-3α真核表達質粒并轉化腫瘤細胞，通過篩選獲得穩定表達MIP-3α的腫瘤細胞。同時培養大腸桿菌并溶于海藻酸鹽溶液中，經高溫高壓消毒后將MIP-3α腫瘤細胞混勻于細菌海藻酸鹽溶液中，此后采用霧化器將“MIP-3α腫瘤細胞細菌海藻酸鹽溶液”進行霧化，并將霧化顆粒噴入氯化鈣溶液中，經過紗網過濾后獲得可以注射的MIP-3α腫瘤細胞細菌海藻酸鹽微顆粒，“MIP-3α腫瘤細胞細菌海藻酸鹽微顆?！痹隗w外培養環境中可以表達分泌MIP-3α蛋白。將微顆粒注入小鼠膜腔，在腫瘤模型中證實有效抑制腫瘤生長和轉移，具有明顯的治療腫瘤的作用。

1.一種可以誘導腫瘤免疫反應的海藻酸鹽微顆粒的制備方法，其特征在
于：包括以下步驟：
（1）、構建MIP-3α真核表達質粒并將其轉染腫瘤細胞；
（2）、通過G418篩選獲得可以穩定表達MIP-3α的腫瘤細胞株，稱為
MIP-3α腫瘤細胞；
（3）、培養大腸桿菌，將海藻酸鹽按1.5g/100ml的比例溶于純水，配
制成質量濃度為1.5%的海藻酸鹽溶液；同時挑取在平板上培養的大腸
桿菌DH5α培養12～14小時，第二天在8000?rpm、離心1分鐘條件下獲
得大腸桿菌，用PBS或生理鹽水清洗1-2次后按1×10⁷/ml比例將大腸桿
菌加入質量濃度為1.5%的海藻酸鹽溶液中，獲得細菌海藻酸鹽溶液；
（4）、配制250?mmol/L濃度的氯化鈣溶液，將細菌海藻酸鹽溶液和
250?mmol/L濃度的氯化鈣溶液二者在121℃，0.1~0.15?MPa，20?m
in條件下高溫高壓消毒；然后在無菌條件下，將步驟（2）的MIP-3α
腫瘤細胞加入經高溫高壓消毒后的細菌海藻酸鹽溶液中，此時獲得的
混合液為“MIP-3α腫瘤細胞細菌海藻酸鹽溶液”；
（5）、通過霧化器將步驟（4）的“MIP-3α腫瘤細胞細菌海藻酸鹽溶
液”進行霧化，并將霧化顆粒噴入250?mmol/L的氯化鈣溶液中，經過
孔徑大小不同紗網過濾后獲得直徑50-300μm并且可以注射的“MIP-3
α腫瘤細胞細菌海藻酸鹽微顆?！?。