本發(fā)明公開了一種從胡蘆巴中分離制備黃酮苷和二苯乙烯苷類化合物的方法。該發(fā)明采用高速逆流色譜（HSCCC）分離技術(shù)，對(duì)胡蘆巴中牡荊素，異牡荊素等同分異構(gòu)體，以及與其極性相近的土大黃苷、脫氧土大黃苷和丹葉大黃素等二苯乙烯苷類化合物類進(jìn)行了分離制備，有效縮短了分離時(shí)間，克服了傳統(tǒng)制備方法操作復(fù)雜，樣品死吸附損失，收率低等缺點(diǎn)。該方法工藝簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，分離效率高，所得單體含量均高于96.0%，符合一類植物新藥和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品要求，適用于醫(yī)藥、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、保健食品和保健藥物等的工業(yè)化生產(chǎn)。

1.一種制備黃酮苷和二苯乙烯苷類化合物的方法，包括如下步驟：1)將胡蘆巴提取物用去離子水溶解后先用石油醚萃取，取下層液再用乙酸乙酯萃取，取上層液得到乙酸乙酯萃取液，再減壓蒸干，得到待分離樣品A；2)將體積比為1：5～10：1～4：5～12的正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水混勻后靜置分層，分別收集上相溶劑和下相溶劑，分別超聲5～30分鐘，以上相為固定相，下相為流動(dòng)相，向高速逆流色譜儀器的分離管中泵入所述固定相，保持分離管溫度為25～40℃，以600～950rpm的轉(zhuǎn)速正轉(zhuǎn)10～20min后泵入所述流動(dòng)相，待體系平衡后，泵入上樣溶液A進(jìn)行高速逆流色譜分離，檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm，依次得到流分I₀、I和II，再除去所述流分I₀中的流動(dòng)相后得到待分離樣品B；其中，流分I中含有脫氧土大黃苷；流分II中含有丹葉大黃素；所述上樣溶液A為將步驟1)所得待分離樣品A溶于所述流動(dòng)相而得；3)將溶劑體系a或b混勻后靜置分層，分別收集上相溶劑和下相溶劑，分別超聲5～30分鐘，以上相為固定相，下相為流動(dòng)相，向高速逆流色譜儀器的分離管中泵入所述固定相，保持分離管溫度為25～40℃，以600～950rpm的轉(zhuǎn)速正轉(zhuǎn)10～20min后泵入所述流動(dòng)相，待體系平衡后，泵入上樣溶液B進(jìn)行高速逆流色譜分離，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，依次得到流分III、IV、V和VI；其中，溶劑體系a由體積比為9-10：10的乙酸乙酯和水組成；溶劑體系b由體積比為9-10：0-1：10的乙酸乙酯、醇和水組成；所述醇為甲醇或正丁醇，且所述醇的體積不為0；所述流分III中含有葒草素；所述流分IV中含有牡荊素；所述流分V中含有土大黃苷；所述流分VI中含有異牡荊素；所述上樣溶液B為將步驟2)所得待分離樣品B溶于所述流動(dòng)相而得。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟1)減壓蒸干步驟中，溫度為50～80℃，壓力為0.05～0.08MPa。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述胡蘆巴提取物為用乙醇水溶液從胡蘆巴種子中提取得到的物質(zhì)。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述乙醇水溶液的質(zhì)量百分濃度為60-95％；或，所述乙醇水溶液與胡蘆巴種子的用量比為5-10mL：1g；或，所述提取為加熱回流提取或微波提取或超聲提取。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述乙醇水溶液的質(zhì)量百分濃度為75％；或，所述乙醇水溶液與胡蘆巴種子的用量比為8mL：1g。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述加熱回流提取中，溫度為50-90℃；次數(shù)為1-3次，每次的提取時(shí)間均為1-2小時(shí)；或，所述微波提取步驟中，功率為150-600W；次數(shù)為1-3次；提取時(shí)間為60-120s；或，所述超聲提取步驟中，超聲功率為100-150W；溫度為70-80℃；次數(shù)為1-3次，每次的提取時(shí)間均為1-2小時(shí)；或，制備所述胡蘆巴提取物中，所述提取步驟之前，還包括如下步驟：將胡蘆巴的種子切割或粉碎后過40-60目篩。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于：所述微波提取步驟中，功率為500W；提取時(shí)間為90s；或，所述超聲提取步驟中，超聲功率為120W。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中，所述待分離樣品A與流動(dòng)相的用量比為50～300mg：5～15mL；或，所述固定相的流速為10-30ml/min；或，所述上樣溶液的流速為1.0～2.5mL/min；或，所述流分I₀、I和II的出峰時(shí)間依次為50～150min、220～260min和305～340min。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中，所述固定相的流速為30ml/min。10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一所述的方法，其特征在于：所述步驟3)中，所述待分離樣品B與流動(dòng)相的用量比為50～300mg：5～15mL；或，所述上樣溶液的流速為1.0～2.5mL/min；或，所述流分III、IV、V和VI的出峰時(shí)間依次為120～140min、150～175min、190～220min、240～260min。