一種利用豬血制備凝血酶的方法，依照下列步驟進行：(1)向豬血中加入抗凝劑，離心分離，取上層的抗凝血漿；(2)向抗凝血漿中加入1.0mol/L BaCl溶液，依次進行攪拌、靜置、離心，然后棄上清；(3)將步驟(2)中的沉淀依次通過洗滌、離心后，棄上清；(4)將步驟(3)中的沉淀用0.2mol/L EDTA，pH5.3溶解，調pH至5.3，然后靜置、離心、棄上清；(5)將步驟(4)中的沉淀用EDTA進行溶解吸附，用Ca激活凝血酶原，得凝血酶原溶液，再將凝血酶原溶液的pH調至7.1，室溫靜置2-3h，過濾即得凝血酶溶液。該方法操作簡便，生產周期短，易于工業化生產，制備出的凝血酶純度高。

1.一種利用豬血制備凝血酶的方法，其特征在于：依照下列步驟進行：
(1)向豬血中加入抗凝劑-檸檬酸鈉，離心分離，取上層的抗凝血漿；
(2)向抗凝血漿中加入BaCl₂溶液后依次進行攪拌、靜置、離心，然后棄上
清；
(3)將步驟(2)中的沉淀依次通過洗滌、離心后，棄上清，重復洗1-2次
或多次；
(4)將步驟(3)中的沉淀用pH為5.3的EDTA溶解，調pH至5.3，然后
靜置、離心、棄上清；
(5)將步驟(4)中的沉淀用生理鹽水溶解，得凝血酶原溶液，凝血酶原溶
液用2％Na₂CO₃溶液調pH至7.1，加入0.25mol/L?CaCl₂溶液作為凝血酶原的
活化劑，使Ca²⁺終濃度為0.02-0.04mol/L，再用2％Na₂CO₃溶液將凝血酶原溶
液的pH調至7.1，室溫靜置2-3h，過濾即得凝血酶溶液；
(6)將凝血酶溶液凍干，即得凝血酶產品。
2.根據權利要求1所述的一種利用豬血制備凝血酶的方法，其特征在于：
上述檸檬酸鈉的添加量為3.8‰-4.5‰。
3.根據權利要求1所述的一種利用豬血制備凝血酶的方法，其特征在于：
上述BaCl₂溶液與抗凝血漿的體積比為1∶10，兩者混合后4℃攪拌30min，靜
置30min后，3000r/min離心30min，棄上清。
4.根據權利要求1所述的一種利用豬血制備凝血酶的方法，其特征在于：
上述步驟(2)中的沉淀通過0.02mol/L?Tris、0.15mol/L?BaCl₂和0.10mol/L?NaCl
混合后形成的pH為7.4的溶液洗滌，3000r/min離心15min，棄上清。
5.根據權利要求1所述的一種利用豬血制備凝血酶的方法，其特征在于：
上述步驟(4)中的沉淀通過0.2mol/L?EDTA溶解后4℃放置6-8h，3000r/min
離心15min，棄上清。