本發明涉及一種Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三錳納米顆粒的制備方法，包括：葉酸與NH?PEG?COOH混合得FA?PEG?COOH；將乙酰丙酮錳與PEI反應得MnO?PEI NPs，FI修飾，加入NOTA?NHS和活化后的FA?PEG?COOH，乙酰化，得NOTA?MnO?PEI?Ac?FI?(PEG?FA)NPs；乙酸銨與[Cu]CuCl反應后加到NOTA?MnO?PEI?Ac?FI?(PEG?FA)NPs溶液中，反應即得。本發明的方法制備過程簡單，易于操作；所得材料具有良好的PET/MR雙模態成像效果，在多模態納米造影劑領域具有潛在的應用價值。

1.一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三錳納米顆粒的制備方
法，包括：
(1)將EDC加入到葉酸FA溶液中活化，然后加入NH₂-PEG-COOH，攪拌1-2天，得到FA-PEG-
COOH；
(2)將乙酰丙酮錳分散到PEI溶液中，攪拌，然后150-180℃下反應12-24h，離心，透析，
冷凍干燥，得到PEI穩定的四氧化三錳納米顆粒Mn₃O₄-PEI NPs；
(3)向步驟(2)中的Mn₃O₄-PEI NPs溶液中加入異硫氰酸熒光素FI溶液，攪拌，得到Mn₃O₄-
PEI-FI NPs；
(4)向步驟(3)中的Mn₃O₄-PEI-FI NPs溶液中加入螯合劑NOTA-NHS溶液，攪拌，得到
NOTA-Mn₃O₄-PEI-FI NPs；
(5)將步驟(1)中的FA-PEG-COOH的溶液經過EDC活化，然后加入到步驟(4)中的NOTA-
Mn₃O₄-PEI-FI NPs溶液中，攪拌，得到功能化的四氧化三錳納米顆粒NOTA-Mn₃O₄-PEI-FI-
(PEG-FA)NPs，其中FA-PEG-COOH與NOTA-Mn₃O₄-PEI-FI NPs的摩爾比為22:1；
(6)將三乙胺N(C₂H₅)₃和乙酸酐Ac₂O加入到步驟(5)中的NOTA-Mn₃O₄-PEI-FI-(PEG-FA)
NPs溶液，進行乙酰化，透析，冷凍干燥，得到功能化的四氧化三錳納米顆粒NOTA-Mn₃O₄-PEI-
Ac-FI-(PEG-FA)NPs；
(7)將乙酸銨溶液加入到[⁶⁴Cu]CuCl₂的鹽酸溶液中，得到[⁶⁴Cu]Cu(OAc)₂，攪拌，然后加
入到步驟(6)中的NOTA-Mn₃O₄-PEI-Ac-FI-(PEG-FA)NPs的溶液中40-45℃反應30-45min，分
離純化，得⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三錳納米顆粒⁶⁴Cu-NOTA-
Mn₃O₄-PEI-Ac-FI-(PEG-FA)NPs。
2.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)FA與NH₂-PEG-COOH的摩爾比為1.5-2：1；
EDC與FA的摩爾比為1：1；活化時間為2-3h。
3.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中乙酰丙酮錳與PEI的質量比為0.25:
0.1；PEI溶液的溶劑為二甘醇DEG；乙酰丙酮錳與DEG的比例為0.25g:15mL。
4.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中FA溶液和步驟(3)中FI溶液的溶劑均
為二甲基亞砜DMSO。
5.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中FI與Mn₃O₄-PEI NPs的摩爾比為7:1。
6.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中NOTA-NHS與Mn₃O₄-PEI-FI NPs的摩爾
比為12:1。
7.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中EDC活化的時間為2-3h；EDC與FA-PEG-
COOH的摩爾比為20:1。
8.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(6)中N(C₂H₅)₃加入后攪拌20-40min，然后加
入Ac₂O，攪拌反應12-24h；N(C₂H₅)₃、Ac₂O和NOTA-Mn₃O₄-PEI-FI-PEG-FA NPs的摩爾比為120-
660:100-550:1。
9.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(7)中乙酸銨、[⁶⁴Cu]CuCl₂和NOTA-Mn₃O₄-
PEI-Ac-FI-(PEG-FA)NPs的比例為每mCi的[⁶⁴Cu]CuCl₂加入0.3mg的NOTA-Mn₃O₄-PEI-Ac-FI-
(PEG-FA)NPs。
10.根據權利要求1所述的一種⁶⁴Cu標記葉酸靶向的功能化聚乙烯亞胺穩定的四氧化三
錳納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(7)中鹽酸溶液的濃度為0.1M；乙酸銨的濃
度為0.4M，且pH為5.5；[⁶⁴Cu]Cu(OAc)₂的放射性活度為37-111MBq；分離純化為：用PD-10脫
鹽層析柱分離純化，以pH＝7.2-7.4的PBS為流動相，用放射性活度儀測量放射性活性以收
集純⁶⁴Cu標記的功能化聚乙烯亞胺介導的四氧化三錳納米顆粒。