1.一種MG53突變體,其特征在于,該MG53突變體為MG53的N端的RING結構域
7個半胱氨酸中的任一個半胱氨酸突變為丙氨酸的突變體;該7個半胱氨酸分別是在RING
結構域的第14位點、第17位點、第29位點、第34位點、第37位點、第53位點、第56位
點。
2.如權利要求1所述的一種MG53突變體的制備方法,其特征在于,該方法是利用定點
突變試劑盒對野生型MG53質粒的全長序列進行定點突變,得到所述的MG53突變體。
3.如權利要求2所述的制備方法,其特征在于,利用定點突變試劑盒對野生型MG53
質粒的全長序列進行突變,得到第14位的半胱氨酸突變為丙氨酸的MG53突變體。
4.如權利要求3所述的制備方法,其特征在于,該定點突變的過程為:
(1)先設計突變引物,使上下游引物都帶有突變位點,重疊區域為18-27bp;
(2)以突變質粒作為模板,使用DNA聚合酶,用特異性突變引物進行PCR反應擴增,
反應產物用瓊脂糖凝膠鑒定;
(3)利用DpnI進行酶切反應處理PCR產物;
(4)轉化大腸桿菌感受態細胞TOP10,融解感受態TOP10,加入處理后的PCR產物,
冰上孵育,加入LB,孵育,涂氨芐抗性LB平板,培養,挑取平板上的單菌落,DNA測序
檢測得突變結果為陽性,即是。
5.權利要求1所述的MG53突變體在制備治療心肌損傷的藥物中的用途。
6.如權利要求5所述的用途,其特征在于,所述藥物包括治療與心肌細胞損傷相關的疾
病的藥物,該疾病包括心肌缺血、心臟缺血/再灌損傷、心肌梗塞、心力衰竭、心律失常、心
臟破裂。
7.如權利要求5或6所述的用途,其特征在于,該MG53突變體為MG53C14A。
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