1.一種狂犬病、破傷風雙效馬抗血清的制備方法,其特征在于包括以
下步驟:
1)挑選健康馬匹,在0、14天注射狂犬病毒滅活抗原,然后于21天進
行破傷風類毒素抗原的初次免疫注射和狂犬病毒滅活抗原的第三針注射,最
后于45和60天同時進行狂犬病毒滅活抗原與破傷風類毒素抗原的加強免疫
注射,每次注射的狂犬病毒滅活抗原和破傷風類毒素抗原均為5ml,
所述狂犬病毒滅活抗原的效價為15~50IU/ml,其佐劑是液體石蠟與羊
毛脂配成的油包水型不完全福氏佐劑,
所述破傷風類毒素抗原的效價為100~500Lf/ml,其佐劑是液體石蠟與
羊毛脂配成的油包水型不完全福氏佐劑;
2)免疫完成后的第15天采集血漿,選取每1ml含抗狂犬病血清效價
100~20000國際單位,含抗破傷風血清效價1100~20000國際單位的血漿,
用注射用水稀釋2~4倍;
3)稀釋后的血漿純化精制,制得每1ml含抗狂犬病血清效價不少于200
國際單位,含抗破傷風血清效價不低于2000國際單位,F(ab’)2片段的純
度不低于60%的狂犬病、破傷風雙效馬抗血清,
所述純化精制的方法包括以下步驟:
1)將稀釋后的血漿調整PH值至3.1~3.7,然后加入胃蛋白酶至胃蛋白
酶的終含量為3~12u/g,消化60~120分鐘后加入硫酸銨鹽析、過濾,取沉淀;
2)將沉淀用注射用水完全溶解,按重量加入0.8~1.2%的明礬,調整PH
值至7.7~7.9,吸附1小時后過濾,除去明礬,上清液超濾濃縮,向濃縮液中
加入注射用水調整蛋白質含量為10~150g/L,并加入氯化鈉、硫柳汞使氯化
鈉的濃度為7.5~9.5g/L、硫柳汞的濃度為0.07~0.1g/L,調pH值至6.0~7.0;
3)將步驟2)得到的溶液用0.20微米濾膜除菌過濾,除菌過濾的壓力
為0.01~0.15MPa。
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